[发明专利]一种普鲁兰多糖的提取工艺

摘要

本发明公开了一种普鲁兰多糖的提取工艺，属于生物技术领域，主要包括如下步骤：(1)板框过滤除菌；(2)热处理脱蛋白；(3)一次超滤；(4)离子交换树脂去除离子；(5)活性炭脱色；(6)二次超滤；(7)干燥、粉碎、包装。本发明采用板框过滤机去除发酵液中的菌体，不仅可以避免有机、无机絮凝剂添加造成的溶剂残留，并且可以进行菌体和硅藻土的回收再利用，获得更多的利益，同时采用微波或真空干燥工艺，可以避免常规工艺过程中因溶剂(乙醇、甲醇、异丙醇等)挥发造成的潜在的不安全因素，并可节约有机溶剂回收蒸馏所消耗的大量蒸汽，降低了生产成本，产品收得率高可达90％-96％，纯度达90％-98％，质量好，生产过程可实现安全化、连续化和自动化。

主权项

一种普鲁兰多糖的提取工艺包括以下步骤：(1)菌体的去除：根据普鲁兰多糖发酵液粘度的不同向普鲁兰多糖发酵液中加入去离子水稀释0.5‑1倍，然后添加100目‑300目硅藻土，用500‑800目滤布预涂硅藻土，采用板框过滤机进行过滤，操作压力为0.14‑0.24Mpa，除去菌体；(2)蛋白质的去除：将除去菌体之后的发酵液，用浓度为1‑5mol/L的NaOH溶液调节pH值为6‑7，加热保温15‑30min，冷却至室温，添加60目‑300目粉末活性炭或100目‑300目硅藻土与60目‑300目粉末活性炭的混合物，然后进行静置或搅拌(转速50‑300rpm)吸附0.5‑3h，最后使用500‑800目滤布预涂100目‑300目硅藻土，采用板框过滤机进行过滤，操作压力为0.14‑0.24Mpa，除去添加的活性炭或硅藻土与活性炭的混合物及变性蛋白质絮凝物；(3)一次超滤脱盐、浓缩：将去除菌体、蛋白质后的发酵液通过截留分子量为1000‑10000daltons的膜组件，根据截留液中盐类分子的含量指标，向发酵液中加入0.5‑1倍体积的去离子水，循环超滤，直至盐类分子含量符合标准；(4)离子去除：包括静态和动态两种吸附处理方式：第一种处理方式(静态吸附)：向经超滤脱盐、浓缩处理后的发酵液中先后加入阴离子交换树脂(WA‑30)、阳离子交换树脂(IR120)(或者阳离子交换树脂(IR120)、阴离子交换树脂(WA‑30))，搅拌(转速100‑400rpm)吸附处理1‑3h进行离子的去除，然后使用三足离心机(转速3000‑4000rpm)，离心5‑20分钟回收阴阳离子交换树脂；第二种处理方式(动态吸附)：将经超滤脱盐、浓缩处理后的发酵液先后通过阴离子交换树脂柱、阳离子交换树脂柱(或者阳离子交换树脂柱、阴离子交换树脂柱)，收集滤出液；(5)活性炭脱色：向经过离子交换树脂处理的发酵液中加去离子水进行稀释，使发酵液中普鲁兰多糖的含量为1.5‑3g/100mL，然后添加60目‑300目粉末活性炭，进行静置或搅拌(转速50‑300rpm)吸附处理1‑3h，最后使用500‑800目滤布预涂100‑300目硅藻土，采用板框过滤机进行过滤，操作压力为0.14‑0.24Mpa，除去所添加的粉末活性炭；(6)二次超滤脱盐、浓缩处理：将脱色后的发酵液通过截留分子量为1000‑10000daltons的膜组件进行二次超滤，根据截留液中盐类分子的含量指标，向发酵液中加入0.5‑1倍体积的去离子水，循环进行超滤，确保溶液中盐类等小分子物质含量符合标准并使普鲁兰多糖含量达到5‑10g/100mL；(7)干燥：将步骤(6)中的普鲁兰多糖液加热至60℃‑90℃蒸发浓缩至普鲁兰多糖含量为20‑30g/100mL，然后铺成0.1‑1.0mm厚进行微波干燥(10KW‑50KW、80℃‑150℃、2‑10分钟)或真空干燥(‑0.08Mpa～‑0.1Mpa、50℃‑70℃、1‑6小时)，干燥至恒重，最后粉碎、包装既得普鲁兰多糖成品。