[发明专利]一种生物有机肥及其制备方法

摘要

本发明公开了一种生物有机肥，其特征在于由下述重量份数的原料组成：酵母菌1-10、乳酸菌2-8，纤维素分解菌1-6，固氮菌1-2、硅酸盐细菌1-2、光合菌1-5；假单胞菌1-5；生物有机肥中含有固氮微生物。可将空气中的N₂还原为可被植物吸收利用的NH₄⁺；生物有机肥还添加一定数量的溶磷微生物和硅酸盐细菌，施后经增殖并与其它微生物协同作用，可分解土壤中某些原次生矿物，将这些矿物所固定的磷、钾等养分释放出来，转化成可供作物吸收利用的有效态养分，提高土壤供肥力。

主权项

一种生物有机肥，其特征在于在是有下述重量份数的原料组成：酵母菌1‑‑10、乳酸菌2‑8，纤维素分解菌1‑6，固氮菌1‑2、硅酸盐细菌1‑‑‑2、光合菌1‑5，假单胞菌1‑5；所述的酵母菌来源1）在26℃下，30h，培养生长酵母菌纯种种子菌；2）将上述酵母菌纯种种子菌接种到培养基中，在26℃下培养48h得到酵母菌纯种菌；3）收获上述酵母菌纯种菌，加入保护剂及附型剂；4）25℃干燥2小时；5）获得粉末型菌体；乳酸菌来源采用涂布法将菌种接种至MRS培养基上，之后进行厌氧培养，温度为36℃；纤维素分解菌来源：(1).牛粪培养基的制备：称取牛粪150g加入1000mL的烧杯中，倒入400mL水，充分搅拌30min，过滤取掉渣制，取100mL加入250mL的三角瓶中待用；(2).摇瓶培养接种剂制备：取以牛粪为原料采用常规方法堆置获得的堆肥40g，过筛后，然后再将过筛后的堆肥称取20g投加到含50mL水的1000mL的烧杯中，充分搅拌30min，待用；(3).取10mL摇瓶培养接种剂投加到100mL液体牛粪培养基的250mL三角瓶中，置于转速为120r/min和温度为45℃的摇床上培养3d～5d；(4).黄孢原毛平革菌Phanerochaete chrysosporium和采用微生物分离的常规方法自牛粪上分离的木霉Trichoderma sp、根霉Rhizopus sp、曲霉Aspergillus sp、花褶伞属真菌Panaeolussp、鬼伞属真菌Coprinus sp的培养：将黄孢原毛平革菌Phanerochaete chrysosporium和Trichoderma sp、根霉Rhizopus sp、花褶伞属真菌Panaeolus sp、鬼伞属真菌Coprinus sp的菌种分别经过含PDA培养基培养，获得其孢子，浓度为每毫升1×108个孢子，其中PDA培养基：采用200g/L的马铃薯浸出液，然后添加20g/L的葡萄糖和17～20g/L的琼脂并定溶至1L；(5).将采用牛粪培养基的发酵获得的发酵液与黄孢原毛平革菌Phanerochaete chrysosporium和Trichoderma sp、根霉Rhizopus sp、花褶伞属真菌Panaeolus sp、鬼伞属真菌Coprinus sp的孢子悬液混合，菌液的体积比为2∶1∶1∶1∶1∶1，然后干燥，获得发酵菌剂；固氮菌来源在无氮培养、温度18~40℃时,菌株均能生长且有固氮酶活性,其最适生长及固氮的温度为26~37℃;在偏酸pH值5.0和偏碱pH值8.0的条件下,菌株均能保持较强的生长势和较高的固氮酶活性,并能通过调节自身代谢适应环境的酸、碱变化,使培养液趋近中性;培养液中NaCl浓度在0.5~2.5g.L‑1、(NH₄)₂SO₄浓度在0.05~0.50g.L‑1时,菌株均能保持旺盛生长且有较高的固氮酶活性；硅酸盐细菌来源农大南校绿地土壤2‑5cm下土壤；光合菌来源用塑料桶进行大规模生产或用培养虾苗用的塑料袋来做效果更好，一袋20公斤的样子，例如容器选用25公斤装的大塑料桶，由于条件不如做小试验的培养方法好，所以接种量要达到至少20%以上的量，即往大塑料桶中加入22.5公斤的配制好的培养液（即1%的培养基溶液，配方氯化氨1克，磷酸氢二钾0.5克，氯化镁0.2克，氯化钠2克，酵母膏0.1克，水900毫升；     各成份溶解后15磅灭菌20分钟，然后无菌的加入过滤的碳酸氢钠5.0克/50毫升水；50毫升过滤的乙醇；用过滤的0.1N磷酸调PH=7.0即可；再加入2.5公斤的菌种液，摇匀；把上述塑料桶放到太阳底下晒即可，只要注意：夏季气温过高，若用太阳作为光照能源，则应采取部分遮阳，通风的降温措施，以防光合细 菌快速老化死亡；冬天则气温低，则要采取搭建一个塑料暖棚增温的方法，把塑料桶放入暖棚内晒太阳即可；春秋季则可直接放在太阳底下不用管即可，温度在25℃‑36℃之间；假单胞菌来源假单胞菌(Pseudomonas sp.)12‑3#保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCCNo.5449；其中所述固体无机盐培养基(1000mL) 由4.0g NaNO₃、1.5g KH₂PO₄、0.5g Na₂HPO₄、0.005g FeCl₃、0.01g，CaCl₂、20g 琼脂粉和20mg/L 的DDT 组成。