[发明专利]一种生物法合成聚3-羟基丙酸的方法

摘要

本发明提供了一种重组大肠杆菌工程菌株、该菌株的制备方法以及利用该重组大肠杆菌工程菌株通过生物法从乙酰辅酶A生物合成聚3-羟基丙酸的方法。本发明通过以葡萄糖或甘油等为碳源，在适当的宿主细胞(例如，大肠杆菌)中共同过量表达内源或外源的乙酰辅酶A羧化酶基因(acc)和丙酰辅酶A合成酶基因(prpE)，以及外源的丙二酸单酰辅酶A还原酶基因(mcr)和聚羟基脂肪酸合成酶基因(phaC)，利用葡萄糖降解中间产物乙酰辅酶A生物合成聚3-羟基丙酸。其中乙酰辅酶A最终是从诸如葡萄糖的简单起始材料获得。

主权项

一种重组大肠杆菌菌株，所述菌株包含：(1)编码乙酰辅酶A羧化酶的核酸分子、与乙酰辅酶A羧化酶基因具有70％以上同源性且编码具有乙酰辅酶A羧化酶功能的蛋白的核酸分子或与乙酰辅酶A羧化酶基因没有明显的同源性但编码具有乙酰辅酶A羧化酶功能的蛋白的核酸分子；(2)编码丙二酸单酰辅酶A还原酶的核酸分子、与丙二酸单酰辅酶A还原酶基因具有70％以上同源性且编码具有丙二酸单酰辅酶A还原酶功能的蛋白的核酸分子或与丙二酸单酰辅酶A还原酶基因没有明显的同源性但编码具有丙二酸单酰辅酶A还原酶功能的蛋白的核酸分子；(3)编码丙酰辅酶A合成酶的核酸分子、与丙酰辅酶A合成酶基因具有70％以上同源性且编码具有丙酰辅酶A合成酶功能的蛋白的核酸分子或与丙酰辅酶A合成酶基因没有明显的同源性但编码具有丙酰辅酶A合成酶功能的蛋白的核酸分子；和(4)编码聚羟基脂肪酸合成酶的核酸分子、与聚羟基脂肪酸合成酶基因具有70％以上同源性且编码具有聚羟基脂肪酸合成酶功能的蛋白的核酸分子或与聚羟基脂肪酸合成酶基因没有明显的同源性但编码具有聚羟基脂肪酸合成酶功能的蛋白的核酸分子。