[发明专利]一种基于RNA干扰的抗柑橘全爪螨育种方法有效
申请号: | 201210492314.9 | 申请日: | 2012-11-28 |
公开(公告)号: | CN103045643A | 公开(公告)日: | 2013-04-17 |
发明(设计)人: | 冉春;张云飞;刘浩强;何永睿;陈善春;陈飞;李鸿筠;李俊丽 | 申请(专利权)人: | 冉春 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/00 |
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地址: | 400712 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于RNA干扰的抗柑橘全爪螨育种方法,从柑橘全爪螨转录组数据库鉴定出几丁质酶基因Unigene10731,进行真实性检测后应用RACE技术获得全长序列,然后在NCBI上搜索比对保守序列,合成对应的dsRNA,将正、反向几丁质酶目的片段先后插入到载体内含子两端,从而构成反向互补发卡结构的RNAi载体“PFGC-10731P1F1/10731P2F2”,将此RNAi载体转载于农杆菌中对柑橘苗木进行侵染,进而对转基因柑橘苗木进行抗螨性评价,获得抗柑橘全爪螨的转基因材料。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 rna 干扰 柑橘 全爪螨 育种 方法 | ||
【主权项】:
一种基于RNA干扰的抗柑橘全爪螨育种方法,其特征在于,该育种方法从柑橘全爪螨转录组数据库鉴定出几丁质酶基因Unigene10731,进行真实性检测后应用RACE技术获得全长序列,然后在NCBI上搜索比对保守序列,合成对应的dsRNA,将正、反向几丁质酶目的片段先后插入到载体内含子两端,从而构成反向互补发卡结构的RNAi载体“PFGC‑10731P1F1/10731P2F2”,将此RNAi载体转载于农杆菌中对柑橘苗木进行侵染,进而对转基因柑橘苗木进行抗螨性评价,获得抗柑橘全爪螨的转基因材料。
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