[发明专利]一种鉴定鲤鱼基因拷贝数的方法有效
申请号: | 201210440095.X | 申请日: | 2012-11-07 |
公开(公告)号: | CN103103254A | 公开(公告)日: | 2013-05-15 |
发明(设计)人: | 李红霞;俞菊华;李建林;唐永凯 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 楼高潮 |
地址: | 214081*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公布了一种鉴定鲤鱼基因拷贝数的方法,包括以下步骤:(1)提取鲤鱼总DNA;(2)选取已知的鲤鱼单、双拷贝基因作为对照基因,设计其定量PCR引物,并设计目的基因的定量PCR引物;(3)以鲤鱼总DNA为模板,以单、双拷贝对照基因引物和目的基因的定量PCR引物为引物进行实时定量PCR;(4)比较目的基因和对照基因的扩增曲线,确定目的基因的拷贝数。运用本发明所述的方法,可以在分子水平快速准确地鉴定目的基因的单双拷贝数,为鲤鱼染色体间遗传物质交流或分子育种等研究提供直接、有效的分子证据。 | ||
搜索关键词: | 一种 鉴定 鲤鱼 基因 拷贝 方法 | ||
【主权项】:
一种鉴定鲤鱼基因拷贝数的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)提取鲤鱼总DNA;(2)选取已知的鲤鱼单、双拷贝基因作为对照基因,设计其定量PCR引物,并设计目的基因的定量PCR引物;(3)以鲤鱼总DNA为模板,以单、双拷贝对照基因引物和目的基因的定量PCR引物为引物进行实时定量PCR;(4)比较目的基因和对照基因的扩增曲线,若目的基因的扩增曲线与单拷贝对照基因的扩增曲线基本重合,则为单拷贝基因;若目的基因的扩增曲线与双拷贝对照基因的扩增曲线基本重合,则为双拷贝基因。
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