[发明专利]小球藻多肽微胶囊的制备方法

摘要

本发明提供小球藻多肽微胶囊的制备方法，首先采用低温超高压连续流细胞破碎机提取小球藻蛋白，木瓜蛋白酶水解小球藻蛋白，超滤离心管过滤,离子交换色谱DEAE-52和凝胶色谱葡聚糖凝胶G-25柱分离纯化，再采用复凝聚法制备小球藻多肽微胶囊。本发明得到的小球藻多肽微胶囊具有下述抗肿瘤活性：对人肝癌细胞HepG2体外生长具有一定的抑制作用，当浓度为400μg/mL时，抑制率可达38%。因而，本发明得到的小球藻多肽微胶囊有利于抗肿瘤保健食品和医药产品的开发利用。

主权项

小球藻多肽微胶囊的制备方法，其特征在于具体包括下列步骤：（1）将小球藻粉和纯水混合后搅拌得混合溶液，在所述混合溶液中提取小球藻蛋白质，得到的粗提液作为下一次的待提取溶液进行再提取；（2）将步骤（1）所述再提取后得到的溶液离心，去除沉淀获得蛋白上清液, 再真空冷冻干燥，获得小球藻蛋白质粉； （3）在步骤（2）所得的小球藻蛋白质粉中，配置浓度为1~4%（w/v）的小球藻蛋白水溶液，加入水解酶进行水解，水解后，灭酶，冷却至室温后将水解液离心，取上清液；（4） 步骤（3）所述上清液经截留分子量为10 KD的超滤离心管过滤，滤液再经过3 KD、5 KD的超滤离心管过滤，即获得分子量大小范围为＜3 KD、3‑5 KD、5‑10 KD、>10 KD的小球藻多肽水解液；（5）以步骤（4）得到的3‑5 KD小球藻多肽水解液为基础，使用离子交换色谱DEAE‑52分离纯化，按照出峰顺序共收集到四个峰A1~A4， 将收集到的吸收峰A2再进行凝胶色谱葡聚糖凝胶G‑25分离纯化，按照出峰顺序共收集到二个峰A2‑1和A2‑2；(6) 以步骤（5）得到小球藻多肽水解液A2‑1为基础,采用复凝聚法制备小球藻多肽微胶囊。