[发明专利]一种快速鉴定菊花花粉与柱头互作差异蛋白的方法有效

专利信息
申请号: 201210315398.9 申请日: 2012-08-30
公开(公告)号: CN102841126A 公开(公告)日: 2012-12-26
发明(设计)人: 滕年军;黄至喆;陈发棣;张凤姣;房伟民;蒋甲福;管志勇;陈素梅;刘兆磊 申请(专利权)人: 南京农业大学
主分类号: G01N27/62 分类号: G01N27/62
代理公司: 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人: 徐冬涛;李晓峰
地址: 210095 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种快速鉴定菊花花粉与柱头互作差异蛋白的方法,属于菊花蛋白质组学领域。该方法包括:以栽培菊花作母本,野菊为父本进行菊花远缘杂交工作。授粉后1h及24h,剪下已授粉的花序;去除取得的花序中舌状花花瓣及萼片得到雌蕊。所得的雌蕊用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质样品;运用iTRAQ与质谱技术快速鉴定差异蛋白,并进行生物信息学分析。本发明针对菊花及其近缘属野生种,提供了一种快速准确鉴定菊花花粉与柱头互作过程中的关键差异蛋白,为解决菊花远缘杂交不亲和性提供研究基础。
搜索关键词: 一种 快速 鉴定 菊花 花粉 柱头 差异 蛋白 方法
【主权项】:
一种快速鉴定菊花花粉与柱头互作差异蛋白的方法,其特征在于包括以下步骤: (1)以栽培菊花作母本,野菊为父本进行菊花远缘杂交工作,于授粉后1h及24h,分别剪下已授粉的花序;(2)去除所述花序中的舌状花花瓣及萼片得到授粉后1h的雌蕊和授粉后24h的雌蕊,将所述的的雌蕊分别用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质,得到授粉后1h雌蕊的蛋白质样品(I)和授粉后24h雌蕊的蛋白质样品(II);(3)将授粉后1h雌蕊的蛋白质样品(I)和授粉后24h雌蕊的蛋白质样品(II)分别运用iTRAQ与质谱技术快速鉴定差异蛋白,并进行生物信息学分析鉴定出菊花花粉与柱头互作差异蛋白。
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