[发明专利]一种胃黏膜上皮细胞ATP4B启动子驱动的SV40T-GFP真核表达载体无效

专利信息
申请号: 201210232385.5 申请日: 2012-07-06
公开(公告)号: CN103627720A 公开(公告)日: 2014-03-12
发明(设计)人: 范忠泽;王金玉;孙珏;李琦;赵成根;张隆;殷佩浩;李大力;叶乃菁 申请(专利权)人: 上海中医药大学附属普陀医院
主分类号: C12N15/79 分类号: C12N15/79;C12N15/66
代理公司: 上海信好专利代理事务所(普通合伙) 31249 代理人: 贾慧琴
地址: 200062 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种胃黏膜上皮细胞ATP4B启动子驱动的SV40T-GFP真核表达载体,是包含ATP4B启动子序列、SV40T基因序列、以及携带绿色荧光蛋白GFP基因序列的载体质粒DNA序列的基因融合重组质粒;该真核表达载体通过以下步骤构建:步骤1,克隆ATP4B启动子序列;步骤2,将步骤1所得的ATP4B启动子序列插入携带GFP基因序列的载体质粒中,并进行验证;步骤3,将SV40T基因序列插入步骤2所得的携带ATP4B启动子序列和GFP基因序列的载体质粒,并进行酶切鉴定和测序。本发明提供的胃黏膜上皮细胞ATP4B启动子驱动的SV40T-GFP真核表达载体,对细胞无损伤,且具有经济简便的优点,并可以为进一步研究胃癌发生机制及开展胃癌的诊断与基因治疗奠定提供研究对象,奠定实验基础。
搜索关键词: 一种 黏膜 上皮细胞 atp4b 启动子 驱动 sv40t gfp 表达 载体
【主权项】:
一种胃黏膜上皮细胞ATP4B启动子驱动的SV40T‑GFP真核表达载体,其特征在于,该真核表达载体是包含ATP4B启动子序列、SV40T基因序列、以及携带绿色荧光蛋白GFP基因序列的载体质粒DNA序列的基因融合重组质粒;所述的ATP4B启动子序列是在胃黏膜上皮细胞中特异性表达的H+/K+ ATP酶的β亚基启动子序列;所述的SV40T序列是猿猴病毒抗原蛋白基因序列;所述的绿色荧光蛋白GFP基因是报告基因;所述的载体质粒是可以在宿主中复制和生存的真核表达质粒。
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