[发明专利]一种鸡坏死性肠炎（A型）灭活疫苗制备方法

摘要

本发明涉及一种用合成培养基生产鸡坏死性肠炎（A型）灭活疫苗的方法。目前国内尚没有针对鸡坏死性肠炎的灭活疫苗，而针对其他动物的梭菌疾病灭活疫苗通常采用的是肉肝胃酶消化汤培养基，该培养基其主要成分牛肉和肝等，受动物品种、年龄、新鲜及消化程度的影响较大，造成培养基质量不稳定、批次间离散度大且制作过程繁琐，进而影响疫苗的质量，特别是疫苗的均一性。而本发明所提供的合成培养基，克服了以上的缺陷，是进行细菌高细胞密度培养的发展趋势，具有操作简便、质量稳定的优点，为高品质的鸡坏死性肠炎（A型）灭活疫苗生产提供了有力的保障。

主权项

一种鸡坏死性肠炎A型灭活疫苗的制备方法，其特征在于将A型产气荚膜梭菌CVCC37株种子液按培养基总量的1％～2％接种于以胰酪蛋白胨和酵母浸出粉为主要原材料的液体合成培养基中，37℃厌氧发酵培养/或静置培养6小时，培养结束后经3000r/min离心30min，去除菌体，分别用8Ku截留分子量的millipore超滤浓缩系统进行超滤浓缩，经0.6％的甲醛溶液灭活脱毒完全后，加入终浓度20％的氢氧化铝胶配制成疫苗；其中所使用合成培养基的配方(W/V)是：蛋白胨1.5g，酵母粉0.5g，氯化钠0.25g，磷酸氢二钾0.45g，葡萄糖0.5g，氯化铁0.0001g，半胱氨酸盐酸盐0.05g，Vc0.001g，去离子水加至100ml。