[发明专利]一种采用后编码方式制备双荧光发射纳米探针的方法

摘要

一种采用后编码方式制备双荧光发射纳米探针的方法，以碲化镉量子点与金纳米簇作为荧光编码元素，硅球作为编码元素的载体，结合量子点与金纳米簇的荧光特性，先合成可用于后编码的荧光探针前躯体，再利用该前躯体中加入光学调节剂的后编码方式制备双荧光发射纳米探针。所得双荧光发射纳米探针中两编码元素间的荧光强度比值更大，有利于以更高的分辨率观察到荧光信号的变化；制备步骤如下：量子点的制备、量子点包硅、金纳米簇的合成、荧光探针前驱体微球的合成、双荧光发射纳米探针的制备。本发明的优点：该合成方法过程简单，编码探针具有不可逆性，不同批次间重现性良好，提供了一种制备大量可用作荧光成像的双荧光发射纳米探针的有效方法。

主权项

一种采用后编码方式制备双荧光发射纳米探针的方法，其特征在于：以碲化镉量子点与金纳米簇作为荧光编码元素，硅球作为编码元素的载体，结合量子点与金纳米簇的荧光特性，先合成可用于后编码的荧光探针前躯体，再利用该前躯体中加入光学调节剂L‑半胱氨酸的方法制备双荧光发射纳米探针，包括如下步骤：1）将巯基丙酸（MPA）加入到CdCl2中，得到含巯基丙酸的CdCl2溶液；2）将碲粉（Te）、NaBH4与蒸馏水混合，在氮气保护并搅拌的条件下进行还原反应得到NaHTe溶液；3）碲化镉量子点溶液的制备：将NaHTe溶液快速加入到上述含巯基丙酸的CdCl2溶液中，用NaOH水溶液调节溶液的pH为9.0，然后沸水浴加热1.5h，得到碲化镉量子点溶液；4）量子点包硅微球的制备：将上述碲化镉量子点溶液加入乙醇中，加入氨水，搅拌条件下加入四乙氧基硅烷（TEOS），20℃反应2h，离心后弃去上清液，将沉淀物在乙醇中洗涤两次，烘干后得到粉末状量子点包硅微球（CdTe@SiO2）；5）金纳米簇的合成：将反应容器用王水、乙醇、二次水依次洗涤后，先加入牛血清白蛋白（BSA）溶液，然后在37℃和搅拌条件下将氯金酸（HAuCl4）溶液加入牛血清白蛋白（BSA）溶液中，2分钟后，再加入氢氧化钠（NaOH）水溶液引发反应，反应12h后，所得产物透析48h，去除未反应的氢氧化钠（NaOH）及原料，得到金纳米簇溶液；6）荧光探针前驱体微球的合成：将4）中所得的粉末状量子点包硅微球溶于乙醇中，再加入上述金纳米簇溶液和氨水，超声5分钟，然后加入四乙氧基硅烷（TEOS）、十六烷基三甲基溴化铵（CTAB），在20℃温度下反应2h，将所得产物离心分离，沉淀物用60℃乙醇与水逐次洗涤，以除去CTAB及未反应物，得到可用于后编码的荧光探针前躯体微球；7）双荧光发射纳米探针的制备：将上述荧光探针前驱体微球溶于水中，加入不同浓度的等体积荧光调节剂L‑半胱氨酸后，反应20min后，即可制得两波长处荧光强度比值不同的一系列双荧光发射纳米探针。