[发明专利]一种应用于治理微污染水体的异养硝化菌的筛选方法

摘要

本发明公开了一种应用于治理微污染水体的异养硝化菌的筛选方法。方法采取逐步驯化底泥的方法富集应用于微污染水体的异养硝化细菌群，即逐步减低营养物浓度的方式使异养硝化菌成为优势菌群，从而达到富集驯化的目的；接着采用“SYL固体培养基”对驯化后得到的活性污泥内的生物菌群采用平板稀释法与平板划线法分离和纯化；然后采用“SYK液体培养基”对分离、纯化后得到的纯菌进行初筛，得到对氨氮去除率达70％以上的菌株；最后采用灭菌的微污染水体添加微量元素溶液作为处理对象对初筛后的菌株进行复筛，得到应用于微污染水体的异养硝化菌，以有效解决微污染水体的水质恶化问题。

主权项

一种应用于治理微污染水体的异养硝化菌的筛选方法，其特征在于，该方法按下述步骤进行：步骤一，从微污染水体中取底泥，将所取底泥在25℃下于液体培养基中培养驯化十五天，得到驯化后的活性底泥，其中底泥与液体培养基的体积比为：1∶(10～20)；培养驯化过程中每三天更换一次液体培养基，每次更换时所使用的液体培养基不同，所用的液体培养液按照更换次序依次为：配水培养液、3体积的配水培养液与1体积的灭菌微污染水体组成的液体培养基、2体积的配水培养液与1体积的灭菌微污染水体组成的液体培养基、1体积的配水培养液与1体积的灭菌微污染水体组成的液体培养基、灭菌微污染水体；所述的配水培养液的配方为：乙酸钠：0.5g，NH4Cl：0.1g，KH2PO4：0.1g，MgSO4·7H2O：0.05g，CaCl2：0.05g，微量元素溶液：2ml，蒸馏水：1000mL；步骤二，以SYL固体培养基作为分离纯化培养基，依次采用平板稀释法与平板划线法对驯化后的活性底泥内的生物菌群进行分离纯化，得到纯化细菌；所述的SYL固体培养基的配方为：乙酸钠：0.5g，NH4Cl：0.1g，KH2PO4：0.1g，MgSO4·7H2O：0.05g，CaCl2：0.05g，琼脂：18g，蒸馏水：1000mL；步骤三，对分离纯化得到的各细菌分别进行初筛，初筛方法为将待初筛的细菌菌落接种于SYK培养液中后在25℃、120rpm的条件下于空气振荡器中培养4d，同时在培养过程中，采用纳氏试剂比色法对培养中的细菌的氨氮去除率进行检测，其中氨氮去除率达70％以上的细菌菌株为初筛得到的异养硝化细菌，所述SYK培养液的配方为：乙酸钠：0.05g，NH4Cl：0.01g，KH2PO4：0.01g，MgSO4·7H2O：0.01g，CaCl2：0.01g，蒸馏水：1000mL；步骤四，对初筛得到的异养硝化细菌分别进行复筛，复筛方法为将待复筛的异养硝化细菌接种于复筛培养液中后在25℃、120rpm的条件下于空气振荡器中培养48小时，同时在培养过程中，采用纳氏试剂比色法对培养中的异养硝化细菌的氨氮去除率进行检测，其中氨氮去除率达80％以上的异养硝化细菌为应用于治理微污染水体的异养硝化细菌，所述复筛培养液的配方为：微量元素溶液：2mL，灭菌微污染水：1000mL；所述微量元素溶液为：以质量浓度计，1.0g/L EDTA、0.2g/L ZnSO4、0.1g/L MnCl2·4H2O、0.5g/L FeSO4·7H2O、0.5g/L CuSO4·5H2O、0.2g/L CoCl2·6H2O的水溶液。