[发明专利]婴幼儿配方奶米粉中低聚果糖含量的检测方法

摘要

本发明涉及一种婴幼儿配方奶米粉中低聚果糖含量的检测方法。包括：准确称取样品，置于容量瓶中，加入温水溶解，混匀，超声震荡，冷却至室温；准确加入亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液，振荡混匀，加水定容、摇匀；静置，滤纸过滤，准确移取上清液至一容量瓶，乙腈定容，振摇混匀；过0.45µm有机滤膜，供HPLC测定，外标法定量；首先，配制标准工作液并分别注入高效液相色谱仪，测定相应的峰面积，绘制标准曲线；然后将制备好的样液注入高效液相色谱仪，测得相应的峰面积，以标准曲线对样品进行定量，测得样液浓度；再由公式可计算出低聚果糖含量的百分含量，具有方便、快捷、准确等优点。

主权项

1.一种婴幼儿配方奶米粉中低聚果糖的含量测定方法，其特征在于包括如下步骤：（1）试剂（a）乙腈：色谱纯；（b）亚铁氰化钾：分析纯；（c）乙酸锌：分析纯； （d）低聚果糖标准品及纯度：蔗果三糖：100.0%；蔗果四糖：99.2%；蔗果五糖：94.8%；  （e）15%亚铁氰化钾：称取15.0g亚铁氰化钾，用水溶解并定容至100mL；  （f）30%乙酸锌：称取30.0g乙酸锌，用水溶解并定容至100mL；  （g）标准储备液，10mg/mL：准确称取100.0mg蔗果三糖、100.8mg蔗果四糖、105.5mg蔗果五糖，置于一10mL容量瓶，加5mL水溶解，乙腈定容至刻度；  （h）标准系列工作液：以1:1的乙腈—水将标准储备液分别稀释成0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL；（i）水:超纯水；  （2）仪器设备  （a）高效液相色谱仪：岛津 LC-20AD泵，RID-10A示差折光检测器；  （b）电子天平：精确至0.0001g；  （c）超声波提取器；  （d）涡旋混合器；  （3）分析步骤  （a）样品处理：准确称取2.5g样品，精确至0.0001g, 置于50mL棕色容量瓶中，加入30mL温水溶解，水温为45-50℃，充分混匀，超声15min，冷却至室温；准确加入1.0mL15%亚铁氰化钾和1.0mL30%乙酸锌，振荡混匀，加水定容至刻度、摇匀；静置10-15min，滤纸过滤，弃去初滤液，准确移取上清液5.0mL至一10mL容量瓶，乙腈定容至刻度，振摇混匀；过0.45μm有机滤膜，供HPLC测定，外标法定量；   （b）色谱条件：色谱柱：氨基柱，250 mm×4.6mm,5μm；流动相：乙腈-水=73-27；流速：1.5 mL/min；柱温：30℃；示差折光检测器温度：30℃；进样量：10μL；   （c）定量分析：标准曲线绘制：将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪，测定相应的峰面积，以峰面积为横坐标，标准工作液浓度为纵坐标绘制标准曲线；试液测定：将制备好的样液注入高效液相色谱仪，测得相应的峰面积，以标准曲线对样品进行定量，测得样液浓度；   （d）计算：试样中各组分包括蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖的百分含量为：X_i＝[(C×10×50)/(M×5×1000)]×100%；    式中：          C—样液的进样浓度，从标准曲线获取，单位为mg/mL；         50—第一次定容体积，单位为mL；        10—第二次定容体积，单位为mL；        5—上清液体积，单位为mL；        M—试样的质量，单位为g；         X_i分别为X_蔗果三糖、X_蔗果四糖和X_蔗果五糖；样品中低聚果糖的百分含量：              X_低聚果糖=X_蔗果三糖+X_蔗果四糖+X_蔗果五糖。