[发明专利]一种制备螺旋藻双向电泳分析蛋白的方法有效
| 申请号： | 201210084120.5 | 申请日： | 2012-03-27 |
| 公开（公告）号： | CN102645357A | 公开（公告）日： | 2012-08-22 |
| 发明（设计）人： | 汪志平;王景梅;蓝瑾瑾;邵斌;刘新颖;于金鑫;陈子元 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人： | 金祺 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及螺旋藻开发应用技术，旨在提供一种制备螺旋藻双向电泳分析蛋白的方法。该方法是将螺旋藻细胞在-20℃冷冻1.5h后再在4℃融化1h，如此反复冻融5次完全破碎；用Tris-HCl提取液提取3次得到水溶性蛋白，用SDS提取液从沉淀中提得水不溶性蛋白。本发明所建的螺旋藻2-DE分析蛋白制备方法——冻融破壁分步提纯法，与现有螺旋藻2-DE分析蛋白制备方法相比，具有操作简便、仪器设备简单、成本低廉和信息量更丰富等显著优点，可显著提升螺旋藻蛋白质2-DE图谱的信息量和分辨率，从而为后续蛋白质组学等生物信息学研究奠定了必要基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 制备 螺旋藻 双向 电泳 分析 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
一种制备螺旋藻双向电泳分析蛋白的方法，其特征在于，是将螺旋藻细胞在‑20℃冷冻1.5h后再在4℃融化1h，如此反复冻融5次完全破碎；用Tris‑HCl提取液提取3次得到水溶性蛋白，用SDS提取液从沉淀中提得水不溶性蛋白；所述Tris‑HCl提取液的组成：125mM Tris‑HCI，0.9％NaCl，pH 6.8；所述SDS提取液的组成：64mM Tris‑HCl提取液、10％甘油、2％SDS、5％β‑巯基乙醇，pH 6.8；各百分比为质量百分比关系。
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