[发明专利]一种MWNTs-IL/Cyt c/GCE的H2O2生物传感器的制备方法

摘要

本发明提供了一种MWNTs-IL/Cyt c/GCE的H2O2生物传感器的制备方法。将羧基化的多壁碳纳米管和氨基化的离子液体进行化学反应形成酰胺化的碳纳米管，然后将细胞色素c固定在酰胺化的碳纳米管修饰的玻碳电极上增加了它的吸附和催化活性。本发明从安培响应中可以得到过氧化氢的检测线达1.3×10-8M，MWNTs-IL/Cyt c/GCE对过氧化氢的氧化具有灵敏的响应。

主权项

一种MWNTs‑IL/Cyt c/GCE的H2O2生物传感器的制备方法，其步骤是：a.称取5mg羧基化的多壁碳纳米管和10mg氨基化的离子液体、10mg二环己基碳二亚胺和10mL二甲基甲酸胺加入到圆底烧瓶中超声15分钟，然后在50℃下真空干燥24小时；将得到的产物用砂芯漏斗进行抽滤，再分别用二甲基甲酸胺，乙醇和蒸馏水冲洗，洗掉多余的离子液体和溶剂，得到的酰胺化的多壁碳纳米管，在80摄氏度下真空干燥12小时，然后把酰胺化的多壁碳纳米管分散在0.05mg/mL的二次蒸无水乙醇中备用；b.将玻碳电极依次用0.3μm、0.05μm的三氧化二铝悬浊液抛光成镜面，再依次经体积分数为95％的乙醇、二次蒸馏水超声清洗后，得到处理后的玻碳电极；插入盛有5mL含有5mM铁氰化钾探针分子的摩尔浓度为0.1M氯化钾电解质溶液中，并采用以玻碳电极为工作电极、以铂为对电极、以饱和的甘汞电极为参比电极的三电极体系进行循环伏安扫描，对裸玻碳电极进行表征；c.将所述玻碳电极取出用二次蒸馏水冲洗、用洗耳球吹干后滴上5μL的MWNT‑IL置于红外灯下烤干，制得MWNT‑IL修饰的玻碳电极；另外，在4℃条件下将MWNT‑IL修饰的玻碳电极侵入到1mg/ml，pH6.98PBS的细胞色素C溶液中2小时，这样细胞色素c就会固定到MWNT‑IL/GCE表面，得到MWNTs‑IL/Cyt c/GCE；d.采用所述的MWNTs‑IL/Cyt c/GCE为工作电极、以铂为对电极、以饱和的甘汞电极为参比电极的三电极共同插入盛有5mL含有不同浓度H2O2的0.1M磷酸盐缓冲溶液中(PBS，pH＝6.98)进行安培i‑t扫描，得到不同浓度H2O2的安培i‑t图；然后将MWNTs‑IL/Cyt c/GCE工作电极分别换做GCE和MWNT‑IL/GCE重复上述操作，得到不同的安培i‑t图；e.采用origin软件作图，分别绘制GCE和MWNT‑IL/GCE在不同浓度H2O2中电流跟浓度的线性关系，MWNTs‑IL/Cyt c/GCE在不同浓度H2O2中的安培i‑t曲线和电流跟浓度的线性关系。