[发明专利]天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的纯化方法有效
申请号: | 201110339033.5 | 申请日: | 2011-11-01 |
公开(公告)号: | CN102372777A | 公开(公告)日: | 2012-03-14 |
发明(设计)人: | 叶曼;陈昊;张耀洲;陈剑清;舒特俊 | 申请(专利权)人: | 特菲(天津)生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/81 | 分类号: | C07K14/81;C07K1/14 |
代理公司: | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人: | 闫立德 |
地址: | 300457 天津市滨海*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明属于一种天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的纯化方法,方法包括蚕蛹预处理,天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的初步分离纯化,天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的分离纯化的步骤。本发明能利用蚕蛹作为原料,通过分离纯化获得具有药用价值的蚕蛹中天然丝氨酸蛋白酶抑制剂,该方法操作简便,且产量高,适用于大规模生产,提纯的天然丝氨酸蛋白酶抑制剂可作为保健药物,无毒副作用。 | ||
搜索关键词: | 天然 丝氨酸 蛋白酶 抑制剂 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的纯化方法,其特征在于:包括下步骤,(1)蚕蛹预处理,将新鲜蚕蛹与4℃预冷的50mM磷酸缓冲液,pH7.4,按1∶1加入到榨汁机中匀浆30秒,在冰上冰浴5分钟,继续匀浆,重复三次,使蚕蛹中的蛋白充分溶解;将匀浆转移到离心杯中,4℃,每分钟15000转,离心20分钟,取上清液,上清液过九层纱布过滤除去油脂,重复离心和过滤步骤三次;收集过滤后的上清液,4℃,每分钟15000转,离心30分钟,上清液用0.45μm滤膜真空抽滤,4℃保存;(2)天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的初步分离纯化,将上清液置于50℃恒温水浴30分钟,再置离心机每分钟15000转,离心20分钟,取上清;(3)天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的分离纯化,将上清液置于100℃恒温水浴30分钟,再置离心机每分钟15000转,离心20分钟,取上清,再重复该步骤数次,直至100℃恒温水浴无沉淀析出,即可得到天然丝氨酸蛋白酶抑制剂。
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