[发明专利]一种葡萄体细胞胚发生的方法有效
| 申请号： | 201110322197.7 | 申请日： | 2011-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN102499079A | 公开（公告）日： | 2012-06-20 |
| 发明（设计）人： | 徐美隆;柳金凤;李健;秦彬彬;陈春伶 | 申请（专利权）人： | 宁夏林业研究所股份有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 宁夏专利服务中心 64100 | 代理人： | 赵明辉 |
| 地址： | 750004 宁夏回族*** | 国省代码： | 宁夏;64 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种通过体细胞胚发生途径建立葡萄高效再生体系的方法，尤其是一种葡萄体细胞胚发生的方法。包括如下步骤：(1)采集开花前5-7天的花蕾，再清洗消毒并吸干水分备用；(2)将单个雄蕊取出接种在培养基上进行培养；(3)选取浅黄色或白色的颗粒状、质地紧实的胚性愈伤组织，将其接种在培养基上进行培养；(4)将得到的诱导形成的体细胞胚继代在同样的培养基上进行培养；(5)将得到的体细胞胚同样继代在培养基上进行培养。本发明方法通过离体培养葡萄雄蕊，建立了再生体系，所获得再生植株性状均一、稳定，且操作步骤简单，易于遗传工程操作。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 葡萄 体细胞 发生 方法 | ||
【主权项】：
一种葡萄体细胞胚发生的方法，包括如下步骤：(1)在葡萄盛花期，采集开花前5‑7天的花蕾，将采集的花蕾置于2‑4℃条件下存放2‑3天，再清洗消毒并吸干水分备用；(2)将步骤(1)得到的花蕾置于解剖镜下，用无菌的解剖针刺破花瓣，将单个雄蕊取出接种在培养基上进行培养，培养条件为暗培养，温度28±1℃；(3)暗培养45～50天后，选取步骤(2)中得到的浅黄色或白色的颗粒状、质地紧实的胚性愈伤组织，将其接种在培养基上进行培养，培养条件为暗培养，温度28±1℃；(4)暗培养时间30天后，将步骤(3)得到的诱导形成的体细胞胚继代在与步骤(3)中同样的培养基上进行培养，培养条件为500‑1000lx弱光照培养，光照时间16h/d，温度28±1℃；(5)弱光照条件下培养30天后，将步骤(4)得到的体细胞胚同样继代在与步骤(3)中同样的培养基上进行培养，培养条件为2000‑30000lx强光照培养，光照时间16h/d，温度28±1℃。
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