[发明专利]一种从重组蛋白制品中提取残留DNA的磁珠法有效
| 申请号： | 201110302887.6 | 申请日： | 2011-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN103031300A | 公开（公告）日： | 2013-04-10 |
| 发明（设计）人： | 朱红枚;王少雄;王洪芳;吕品 | 申请（专利权）人： | 嘉和生物药业有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 上海天翔知识产权代理有限公司 31224 | 代理人： | 王裕 |
| 地址： | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种从重组蛋白制品中提取残留DNA的磁珠法。本发明公开了一种从重组蛋白制品中提取残留DNA的磁珠法，其包括样品制备、酶切、DNA结合、DNA清洗和DNA洗脱的步骤，其特征在于所述酶切步骤：蛋白酶K与重组蛋白制品中蛋白质的质量比率至少为1：6，37℃孵育不少于10h；所述DNA洗脱步骤，70℃水浴不少于10min。与常规方法相比，本发明方法能将DNA回收率提高50％以上的，即使是痕量DNA(＜1pg)，其回收率也能超过70％，并能稳定在70％-130％之间，符合相关法规要求。该方法适用于重组蛋白制品制备过程的中间体和原液中残留DNA的提取，可用于监测纯化工艺去除外源DNA的能力，满足原液残留DNA批检验的要求，为重组蛋白制品中残留DNA的提取提供了有效的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 从重 组蛋白 制品 提取 残留 dna 磁珠法 | ||
【主权项】：
一种从重组蛋白制品中提取残留DNA的磁珠法，其包括样品制备、酶切、DNA结合、DNA清洗和DNA洗脱的步骤，其特征在于所述酶切步骤：蛋白酶K与重组蛋白制品中蛋白质的质量比率至少为1∶6，37℃孵育不少于10h；所述DNA洗脱步骤，70℃水浴不少于10min。
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