[发明专利]分子删除策略培育精米中无外源基因的转基因水稻的方法无效
申请号: | 201110197435.6 | 申请日: | 2011-07-15 |
公开(公告)号: | CN102286522A | 公开(公告)日: | 2011-12-21 |
发明(设计)人: | 王锋;胡太蛟;陈在杰;朱颜婷;郑雪琴;苏军;陈松彪;刘华清;陈建民 | 申请(专利权)人: | 福建省农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00;A01H1/02 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350003 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明提供了一种分子删除策略培育精米中无外源基因的转基因水稻的方法,该方法包括步骤:构建基于胚乳特异性表达控制的位点特异性重组系统的水稻转化载体;利用该水稻转化载体转化水稻愈伤组织,筛选、分化产生转基因水稻植株;种植转基因水稻植株,获得在胚乳中外源转基因结构已被删除,而在其它组织中外源转基因结构能稳定整合与表达并能稳定遗传的转基因水稻株系。本发明利用重组酶识别序列,有效地提高了删除的效率,最高达到100%删除的效果。本发明采用水稻胚乳特异的启动子控制技术,结合位点特异性重组酶系统自我删除的方法,能在水稻种子的胚乳部位高效特异的删除所有外源基因。 | ||
搜索关键词: | 分子 删除 策略 培育 精米 中无外源 基因 转基因 水稻 方法 | ||
【主权项】:
一种分子删除策略培育精米中无外源基因的转基因水稻的方法,包括以下几个步骤:1) 构建基于胚乳特异性表达控制的位点特异性重组系统的水稻转化载体;所述水稻转化载体含有以下元件:重组酶识别序列;外源目的基因表达盒;胚乳特异性表达启动子控制的重组酶基因表达盒以及用于水稻转化筛选的抗生素抗性表达框;2) 利用该水稻转化载体转化水稻愈伤组织,筛选、分化产生转基因水稻植株;3) 种植转基因水稻植株,检测外源目的基因在转基因植株中不同部位,包括根、茎、叶、胚及胚乳中的表达水平,获得外源目的基因在胚乳中被特异性删除,而在其它组织中均稳定整合并高效表达的转基因水稻植株;4) 种植下一代转基因水稻株系,进一步分子检测外源基因的整合及表达,获得在胚乳中外源转基因结构已被删除,而在其它组织中外源转基因结构能稳定整合与表达并能稳定遗传的转基因水稻株系。
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