[发明专利]一种造纸污水处理用复合菌剂的高密度培养方法

摘要

本发明提供了一种造纸污水处理用复合菌剂的高密度培养方法，在高密度发酵用基础培养基中依次接种黄孢原毛平革菌ATCC20696、珊瑚色诺卡式菌ACCC??40100和铜绿假单胞菌于一定条件下进行发酵培养80～100h；本发明中设计的培养基具有价格低廉(仅为LB培养基的20％左右)、满足本复合菌剂的工业化高密度发酵要求；设计的发酵工艺控制条件达到了复合菌剂的高密度生产要求，实现了节省设备等生产要素的投资，混合菌剂发酵后各菌种比例及活性都符合要求的目的：按照本技术的控制要点，发酵结束后三种成分完全可以达到要求的比例，并且三种菌已经互相适应并保持各自的活性与降解污染物的能力，为复合菌剂的规模化生产及应用奠定了基础。

主权项

一种造纸污水处理用复合菌剂的高密度培养方法，所述方法包括：在高密度发酵用基础培养基中依次接种黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)ATCC 20696、珊瑚色诺卡式菌(Nocardia coralline)ACCC 40100和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)CGMCC No.1.239进行发酵培养，控制温度为28～32℃、pH5.0～7.5、溶解氧为1～5mg·L 1，发酵过程中分批流加总体积为高密度发酵用基础培养基体积10～20％的质量浓度50～60％的葡萄糖溶液，发酵总时间为80～100h；所述高密度发酵用基础培养基组成如下：葡萄糖10～15g·L 1、大豆蛋白胨10～15g·L 1、磷酸二氢钠8～12g·L 1、维生素B1 2～5mg·L 1、生物素0.1～0.5mg·L 1、微量元素母液1～3mL·L 1、发酵用消泡剂0.1mL.L 1、用磷酸调节pH至5.5；所述微量元素母液组成如下：COCl2·6H2O1mg·ml 1、MnCl2·4H2O 6mg·ml 1、CuCl2·2H2O 0.6mg·ml 1、H3BO41.2mg·ml 1、Na2MoO4·2H2O 1mg·ml 1、Zn(CH3COO)2·2H2O 5.2mg·ml 1、FeC6H5O7·5H2O 40mg·ml 1。