[发明专利]甘蓝型油菜BnPABP8启动子及制备方法和应用有效
申请号: | 201110139887.9 | 申请日: | 2011-05-27 |
公开(公告)号: | CN102220327A | 公开(公告)日: | 2011-10-19 |
发明(设计)人: | 刘胜毅;石磊;董彩华 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院油料作物研究所 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/10;C12N15/63;A01H5/00;A01H5/02;A01H5/04;A01H5/06;A01H5/12 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430062 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种甘蓝型油菜BnPABP8启动子及制备方法和应用,步骤:A、引物设计:根据已知序列设计特异性步移引物。B、油菜启动子制备:利用SDS裂解法提取油菜DNA,根据基因组步移试剂盒,进行基因组步移,取5μlDNA用DraⅠ酶切,检测DNA纯度,用四种试剂盒提供的内切酶进行DNA的酶切,并纯化酶切产物,纯化步骤:向酶切液中加入乙醇,沉淀,离心,晾干,用无菌水溶解,纯化完成后加入特异性接头,第一轮PCR反应以GSP1和AP1为引物;第二轮PCR以第一轮PCR反应产物稀释液为模板,以GSP2和AP2为引物扩增,回收纯化第二轮PCR产物,与T载体连接,获得PBnPABP8。PBnPABP8在植物根部、茎部、叶片、花蕾以及花药中的应用。在油菜食用油安全性和利用转基因提高作物抗病,抗逆性,抗倒伏。 | ||
搜索关键词: | 甘蓝 油菜 bnpabp8 启动子 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种分离的启动子PBnPABP8,其序列为SEQ ID No.1 所示的核苷酸序列。
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