[发明专利]牛传染性鼻气管炎病毒毒株及制备方法和应用有效
| 申请号: | 201110137299.1 | 申请日: | 2011-05-24 |
| 公开(公告)号: | CN102337250A | 公开(公告)日: | 2012-02-01 |
| 发明(设计)人: | 金业 | 申请(专利权)人: | 深圳市青珊瑚科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;C12Q1/70;C12Q1/68;A61K39/265;A61P31/22;C12R1/93 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 518048 广东省深圳市福田*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | 本发明公开了牛传染性鼻气管炎病毒毒株及制备方法和应用,发现一株野毒株传染性牛鼻气管炎病毒,首先样品经PCR和荧光PCR鉴定后,然后在MDBK细胞经培养基加经检测没有IBRV的牛血清,培养一定时间,长成单层细胞,用处理过的样品接种后,观察细胞病变,取病变细胞样PCR鉴定为阳性后,TCID50测定为106.2,病毒中和实验,病毒滴度为27,再接种到单层细胞中,待70%-80%的有细胞病变时,将细胞收入-40℃冰箱保存,预防牛的传染性牛鼻气管炎病的工程疫苗的应用。 | ||
| 搜索关键词: | 传染性 气管炎 病毒 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
牛传染性鼻气管炎病毒毒株及制备方法和应用,其特征在于包括以下步骤:a、用无菌棉签提取发病牛鼻腔分泌物送实验室,得腔棉拭子样本;b、以gB‑1和gB‑2为引物,用PCR方法进行检测扩增,病料中扩增出特异性片段,以gB‑F、gB‑R为引物和探针,用PCR和荧光PCR方法检测扩增,鉴定传染性牛鼻气管炎病毒,检测结果均为阳性;c、在MDBK细胞经培养基加经检测没有IBRV的牛血清,后培养一定时间,长成单层MDBK细胞,用PCR和荧光PCR方法检测的腔棉拭子样本接种于单层MDBK细胞,观察细胞病变,待70%‑80%细胞出现病毒病变时,将细胞收入‑40℃冰箱保存。
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