[发明专利]酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯的方法无效
| 申请号: | 201110110431.X | 申请日: | 2011-04-28 | 
| 公开(公告)号: | CN102212575A | 公开(公告)日: | 2011-10-12 | 
| 发明(设计)人: | 阮晖;徐娟;地里热巴;周陈伟;王睿之;林吉恒;何国庆 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 | 
| 主分类号: | C12P17/04 | 分类号: | C12P17/04;C12N15/63;C12N1/19;C12N9/20;C12R1/84 | 
| 代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 | 
| 地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 | 
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| 摘要: | 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯的方法,包括:将L-抗坏血酸和棕榈酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,无氧条件下于50~60℃反应4~8小时,分离、纯化制得L-抗坏血酸棕榈酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。 | ||
| 搜索关键词: | 酵母 展示 脂肪酶 催化 合成 抗坏血酸 棕榈 方法 | ||
【主权项】:
                一种酵母展示脂肪酶催化合成L‑抗坏血酸棕榈酸酯的方法,包括:将L‑抗坏血酸和棕榈酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,无氧条件下于50~60℃反应4~8小时,分离、纯化制得L‑抗坏血酸棕榈酸酯;所述的酵母展示脂肪酶通过如下方法制备:将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;所述的重组质粒由原始载体pPIC9K和依次插入原始载体pPIC9K中MFα1信号肽下游的脂肪酶基因和毕赤酵母GS115的细胞壁α凝集素基因组成。
            
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