[发明专利]跨膜测序中用于核酸构建体的衔接体有效
申请号: | 201080015405.2 | 申请日: | 2010-01-29 |
公开(公告)号: | CN102369298B | 公开(公告)日: | 2017-03-22 |
发明(设计)人: | B·麦克基翁 | 申请(专利权)人: | 牛津纳米孔技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京北翔知识产权代理有限公司11285 | 代理人: | 张广育,胡洪慧 |
地址: | 英国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明涉及用于测序核酸的衔接体。所述衔接体可用于生成用于测序目的的单链核酸构建体。所述构建体可含有双链脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)模板的全部两条链。本发明还涉及使用所述衔接体生成的构建体,制备所述衔接体和构建体的方法,以及测序双链核酸的方法。 | ||
搜索关键词: | 跨膜测序中 用于 核酸 构建 衔接 | ||
【主权项】:
一种评估双链核酸模板的序列的方法,包括:(a)提供其中所述双链核酸模板的两条链是经由衔接体共价连接的构建体,其中所述衔接体包含双链核酸区,所述区是通过单链核酸的两个不同区之间杂交形成并且包含发夹环;(b)使所述构建体变性以形成单链构建体,所述单链构建体包含所述双链核酸模板的正义链和反义链;(c)使所述单链构建体与跨膜孔和核酸操作酶接触,使得所述酶可以使所述单链构建体受控地且逐步地移位通过所述孔,并且所述单链构建体中的一部分核苷酸与所述孔相互作用;以及(d)测量在所述包含所述双链核酸模板的正义链和反义链的单链构建体移位过程中通过所述孔的电流;以及(e)结合(d)中获得的所述正义链和反义链的电流数据以对每个位置上的两个碱基产生比单次观测更高质量的累积访问,从而确定所述双链核酸模板的正义链和反义链的序列。
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