[发明专利]一种获得栽培菊花单倍体的方法

摘要

本发明属于生物技术育种领域，公开了一种获得栽培菊花单倍体的方法。本发明选择栽培菊花品种为“母本”，利用蒙导父本的灭活花粉进行授粉杂交，并采用组织培养手段进行胚珠的离体培养，以克服菊属栽培菊花单倍体的生产和鉴定障碍。对获得的单倍体材料进行形态学鉴定和细胞学鉴定，选择茎、叶、花序、气孔等形态学特征与“母本”不同或出现特异性状单倍体材料，进行细胞学鉴定，若染色体组成为“母本”数目的一半，即为获得的单倍体。应用本方法成功地生产了多个栽培种的单倍体，为菊属植物种质创新和起源进化研究提供了新的材料。

主权项

一种获得栽培菊花单倍体的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)选择菊属栽培菊花或其近缘属植物为蒙导父本，以栽培菊花为“母本”，利用蒙导父本的灭活花粉进行杂交授粉，取杂交授粉后13d的头状花序，剥取边缘舌状花的子房进行消毒处理；(2)将步骤(1)所述的经消毒的子房内的胚珠剥出，接入MS添加细胞分裂素6‑BA2.5mg·L‑1+生长素NAA0.5mg·L‑1的培养基上，诱导愈伤组织形成；(3)愈伤组织形成30～40d后转入分化培养基，分化培养基为MS+细胞分裂素6‑BA2.0mg·L‑1+生长素NAA0.1mg·L‑1，诱导愈伤组织分化出苗；(4)经步骤(3)得到幼苗后将幼苗转入MS添加细胞分裂素6‑BA0.2mg·L‑1的培养基中进行扩繁和继代培养，当幼苗长至2～3cm时，将其移至1/2MS添加生长素NAA0.1mg·L‑1的培养基上生根，培养温度为25±2℃，光照周期为14h·d‑1，光照强度为1500～2000lx，即可获得栽培菊花单倍体材料的无菌苗；(5)对所得材料进行形态学鉴定，选择形态学特征在株高、冠径、分枝性、叶片、花序方面与“母本”不同的植株，进行细胞学鉴定。经细胞学鉴定体细胞染色体数目是“母本”体细胞染色体数目一半的后代材料，即为所述的栽培菊花单倍体。