[发明专利]辣根过氧化酶修饰电极测定酚类化合物的方法

摘要

本发明涉及一种氧化铝纳米粒子/壳聚糖/辣根过氧化酶复合膜修饰玻碳电极测定酚类化合物的方法，属电化学分析检测技术领域。本发明的要点是将一定量的氧化铝纳米粒子/壳聚糖/辣根过氧化酶混合液滴涂在玻碳电极表面，得到修饰的玻碳电极，它相当于一种电流型生物传感器；并利用该氧化铝纳米粒子/壳聚糖/辣根过氧化酶复合膜修饰的玻碳电极对酚类化合物进行电化学的定量测定。本发明测定方法具有快速、灵敏、准确、稳定等特点。

主权项

一种辣根过氧化酶修饰电极测定酚类化合物的方法，其特征在于具有以下的过程和步骤：a.玻碳电极的预处理：首先将玻碳电极用0.05mm Al2O3抛光粉和麂皮进行抛光，抛至光镜面，然后依次用蒸馏水、稀硝酸溶液、无水乙醇及二次蒸馏水超声清洗干净，待用；b.氧化铝纳米粒子/壳聚糖/辣根过氧化酶复合修饰的玻碳电极的制备：首先称取适量的壳聚糖溶解在0.1M醋酸溶液中，并在室温下超声2h，得到0.2～0.6%（W/V，mg/ml）的壳聚糖溶液；然后将适量的氧化铝纳米粒子分散在1ml的上述0.2～0.6%（W/V，mg/ml）壳聚糖溶液，并超声至均匀；另外，用二次蒸馏水配制6～10mg/ml辣根过氧化酶溶液，将该辣根过氧化酶溶液与上述分散有氧化铝纳米粒子的壳聚糖溶液的体积比1：1混合，得到氧化铝纳米粒子/壳聚糖/辣根过程化酶混合溶液；然后取4～8ml的该混合溶液滴涂于上述准备好的玻碳电极表面，并在4℃的冰箱中晾干，放置一夜后待用；c.对酚类化合物的电化学测定：利用上述的氧化铝纳米粒子/壳聚糖/辣根过氧化酶复合膜修饰的玻碳电极当作电流型生物传感器，对酚类化合物进行电化学测定，其测定方法如下：利用电化学工作站采用二电极系统进行测试，即将氧化铝纳米粒子/壳聚糖/辣根过氧化酶复合膜修饰的玻碳电极作为工作电极，饱和甘汞电极作为参比电极，铂片电极作为辅助电极；将该三电极系统置于PH6.0的0.1M磷酸盐缓冲溶液中，在‑1.0V至1.0V循环伏安扫描数圈以活化电极；然后同0.1M酸盐缓冲溶液中加入适量的过氧化氢；选择电流‑时间曲线法，设定一定的应用电位，启动程序，当背晾电流达到稳定后，用微量进样器向上述溶液中加入对苯二酚样品，记录相应的电流信号；在浓度0.005mM～70mM范围内，得到电流与对苯二酚浓度的线性关系，其线性方程为：I(mA)=0.533C(mM)+0.05，线性相关系数r=0.999，利用该线性关系曲线及相应的线性方程，可测定对苯二酚溶液试样的浓度。