[发明专利]一种发根农杆菌介导苦瓜发根高频诱导及遗传转化的方法无效
申请号: | 201010560912.6 | 申请日: | 2010-11-26 |
公开(公告)号: | CN101985633A | 公开(公告)日: | 2011-03-16 |
发明(设计)人: | 刘仲华;毛清黎;王坤波;杨新河;龚雨顺;毛雅慧;李顺文 | 申请(专利权)人: | 毛清黎 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00;A01H5/06 |
代理公司: | 武汉凌达知识产权事务所(特殊普通合伙) 42221 | 代理人: | 宋国荣 |
地址: | 432000 湖北省孝感市*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明涉及一种发根农杆菌介导苦瓜发根高频诱导及遗传转化的方法,选用R1000发根农杆菌菌株感染苗龄10-20d的苦瓜试管苗的茎段或子叶盘在含IBA5.0的MS培养基中共培养1-2d得到共培养的外植体,然后在含500mgL-1头孢霉素的1/2MS0固体培养基上脱菌培养8-10d便可获得苦瓜发根。采用本发明获得的苦瓜发根,发根频率及发根密度最高可达84.2%和12.3,发根中苦瓜总皂甙含量达33.43mg/g,分别比苦瓜试管苗的根、茎和子叶含量高69.1%、48.6%和49.8%。本发明为选育优质高产的苦瓜新品种以及利用Ri质粒为载体,进行有用基因转移奠定了基础,也为利用苦瓜发根培养生物合成苦瓜皂甙等药用成分提供了有效途径。 | ||
搜索关键词: | 一种 发根 杆菌 苦瓜 高频 诱导 遗传 转化 方法 | ||
【主权项】:
一种发根农杆菌介导苦瓜发根高频诱导及遗传转化的方法,其特征在于选用R1000发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)菌株感染苗龄10‑20d的苦瓜试管苗的茎段或子叶盘在含IBA5.0的MS培养基中共培养1‑2d得到共培养的外植体,然后在含500 mgL‑1头孢霉素的1/2MS0固体培养基上脱菌培养8‑10d便可获得苦瓜发根。
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