[发明专利]一种二代高通量测序的不对称DNA双链接头及其应用有效
| 申请号： | 201010544306.5 | 申请日： | 2010-11-15 |
| 公开（公告）号： | CN102061335A | 公开（公告）日： | 2011-05-18 |
| 发明（设计）人： | 李轩;郝沛;潘小宝;黄凯 | 申请（专利权）人： | 苏州众信生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人： | 赵枫 |
| 地址： | 215125 江苏省苏州市工业*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种二代高通量测序的不对称DNA双链接头，由两个DNA寡核苷酸单链组成，其制备方法如下：将所述两个DNA寡核苷酸单链溶于淬火溶液中，调整最终浓度达到2mM，体积20微升，然后利用下述条件进行淬火反应，形成局部互补的DNA双链接头：95℃5min；95℃降到12℃，每秒0.1℃；保持在12℃，将退火后的接头溶液1∶4稀释到500μM，并在-20℃保存。其应用采用如下流程：A、不对称DNA接头与DNA样本的连接反应；B、电泳割胶纯化分离未连接的DNA双链接头；C、判断；D、基于不对称序列的PCR放大反应。本发明的显著优势：1)建库起始DNA样品用量低至50纳克、灵敏度提高达100倍；2)建库的接头连接过程可产生100％的有效测序样本等。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 二代 通量 不对称 dna 链接 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种二代高通量测序的不对称DNA双链接头，其特征是：所述二代高通量测序的不对称DNA双链接头由两个DNA寡核苷酸单链组成，其制备方法如下：将所述DNA寡核苷酸单链溶于淬火溶液中，调整最终浓度达到2mM，体积20微升，然后利用下述条件进行淬火反应，形成局部互补的DNA双链接头：在95℃中5分钟；95℃降到12℃，每秒0.1℃；保持在12℃，将退火后的接头溶液1∶4稀释到500μM，并在‑20℃保存。
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