[发明专利]一种快速检测HER-2 mRNA水平的荧光定量PCR诊断试剂盒

摘要

本发明公开了一种快速检测HER-2 mRNA水平的荧光定量PCR诊断试剂盒，涉及一种癌基因检测技术。本发明由第一链cDNA合成试剂盒、PCR反应液及lightcycler PCR仪组成：第一链cDNA合成试剂盒包含MgCl2、逆转录酶缓冲液、dNTP、RNA酶抑制剂、Oligo(dT)15、AMV逆转录酶和DEPC水，还包含HER-2、内参基因引物和Taqman荧光探针的合成；引物分为上游引物和下游引物。本发明具有较好的特异性，灵敏度和重复性，定量精确，快速简便，适用于HER-2基因的早期特异性地定性定量检测，可为临床乳腺癌的化疗和预后提供更好的依据。

主权项

一种快速检测HER‑2mRNA水平的荧光定量PCR诊断试剂盒，其特征在于：本试剂盒包括第一链cDNA合成试剂盒：25mmol/L MgCl24μL，10×逆转录酶缓冲液2μL，10mmol/L dNTP 2μL，RNA酶抑制剂0.5μL，Oligo(dT)15 0.5μg，AMV逆转录酶15U，DEPC水；试剂盒还包含HER‑2、内参基因引物和Taqman荧光探针的合成，HER‑2基因引物序列包含上游引物和下游引物；上游引物：5′‑GACCGGAGGCTGACCAGT‑3′，下游引物：5′‑GGCAAGGCTGGCATGCGG‑3′；Taqman荧光探针：FAM 5’‑GGCCCGCTGCCCCAGCGGTG‑3’TAMRA；GAPDH基因引物序列包含上游引物和下游引物；上游引物：5′‑GAAGATGGTGATGGGATTTC‑3’，下游引物：5′‑GAAGGTGAAGGTCGGAGTC‑3’；荧光探针：FAM5’‑ACCACCACGGCCGAGCGG‑3’TAMRA。