[发明专利]染色体制备方法及所需培养基及其制备方法

摘要

本发明公开了一种为解决染色体核型分析而提供的一种染色体制备方法及所需培养基及其制备方法，培养基是由RPMI1640、肝素钠、HEPES、L-谷氨酰胺、NaHCO3、青霉素G钾、硫酸链霉素、牛血清、植物血球凝集素(PHA)组成，其检测方法为将人体外周血0.3ml-0.4ml种入该培养基后，在终止培养前2-4h加入秋水仙酰胺使细胞停止于分裂中期，细胞培养至68-72h收获细胞，再经过低渗40mi n，三次固定，显带，染色等处理，在显微镜下进行染色体分析，以确定外周血提供者是否存在染色体异常。本发明的培养基使用方便，操作简单，成本低，患者检测费低，适合于各级医院用于遗传诊断、不孕不育及产前诊断。

主权项

一种用于染色体制备的培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，制备初始溶液，所述初始溶液配方如下：RPMI1640：10‑11g/L、肝素钠：6400‑7000IU、HEPES：1.19‑4.05g/L、L‑谷氨酰胺：0.5‑0.6g/L、NaHCO3：1‑2g/L、青霉素G钾：0.05‑0.1g/L、硫酸链霉素：0.06‑0.1g/L、牛血清：100‑200ml/L、注射用水加至1L，搅拌均匀至澄清溶液；步骤二，过滤除菌，用滤膜将上述初始溶液进行过滤除菌；步骤三，配制植物血球凝集素PHA溶液，用注射用水配制2％植物血球凝集素PHA溶液，备用；步骤四，培养基配制，在过滤后的初始溶液中加入所述植物血球凝集素PHA溶液：50‑200mg/L，搅拌均匀，制得培养基。