[发明专利]基于生物条码的液相芯片检测系统无效

专利信息
申请号: 201010265151.1 申请日: 2010-08-27
公开(公告)号: CN101935704A 公开(公告)日: 2011-01-05
发明(设计)人: 曾令文;熊业华;葛晨晨;方志远 申请(专利权)人: 中国科学院广州生物医药与健康研究院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;G01N21/64
代理公司: 广州三环专利代理有限公司 44202 代理人: 刘宇峰
地址: 510663 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明提供了一种基于生物条码的液相芯片检测系统。该检测系统包括:用于富集、转换并放大靶核酸信号的核酸放大装置;用于测定靶核酸浓度的核酸检测装置;以及液体试剂。本发明中分别标记了核酸的磁珠和纳米金与靶核酸形成“三明治”夹心结构,通过磁架分离,将纳米金上标记的条码核酸固定,通过二硫苏糖醇释放生物条码实现检测信号的转换与放大。在杂交体系中,分别标记了核酸探针的微球和量子点与条码核酸形成夹心结构,通过检测量子点的液相芯片系统将信号进一步放大,从而实现低丰度靶核酸的定量分析。
搜索关键词: 基于 生物 条码 芯片 检测 系统
【主权项】:
一种基于生物条码的液相芯片检测系统,其特征在于,包括:用于富集、转换并放大靶核酸信号的核酸放大装置;用于测定靶核酸浓度的核酸检测装置;以及液体试剂;所述的核酸放大装置包括:以第一寡核苷酸探针标记的磁珠;以及以第二寡核苷酸探针和条码核苷酸经巯基修饰并偶联的纳米金颗粒;其中,所述第一寡核苷酸探针与第二寡核苷酸探针分别与靶核酸的两端序列互补,以致在磁场的作用下通过第一寡核苷酸探针‑靶核酸‑第二寡核苷酸探针的核酸夹心方式将纳米金颗粒固定在磁架上,再通过洗涤去除未结合的纳米金颗粒,用二硫苏糖醇释放出偶联在纳米金颗粒上的条码寡核苷酸;所述的核酸检测装置包括:以第三寡核苷酸探针标记的聚苯乙烯微球;以及以第四寡核苷酸探针标记的量子点;其中,第三寡核苷酸探针和第四寡核苷酸探针分别与条码寡核苷酸两端序列互补配对,以致在液相杂交反应中,形成第三寡核苷酸探针‑条码寡核苷酸‑第四寡核苷酸探针的核酸夹心方式,孵育一段时间后,用液相芯片检测仪读出检测结果;所述液体试剂包括:用于裂解样品释放核酸的裂解缓冲液,包括:100mm Tris‑HCl、pH 7.5、500mm LiCl、10mm EDTA、1%[w/v]十二烷基硫酸锂、5mm二硫苏糖醇、10U RNase抑制剂;以及用于释放结合在纳米金上条码核酸的转换液,包括:0.1M二硫苏糖醇、0.15M NaCl、0.01M NaH2PO4、0.1%SDS,pH 7.4。
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