[发明专利]一种低载量乙型肝炎病毒全基因组克隆的方法无效
| 申请号： | 201010258762.3 | 申请日： | 2010-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN101948827A | 公开（公告）日： | 2011-01-19 |
| 发明（设计）人： | 徐东平;刘妍;许智慧;王耀;李晓东;钟彦伟;戴久增;王琳 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三〇二医院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 王素菊 |
| 地址： | 100039 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 一种低载量乙型肝炎病毒全基因组克隆的方法，从患者血清内提取HBV DNA，采用巢式聚合酶链式反应扩增出HBV的CP-S区和RT-X区，使用内切酶酶切后连接，再以此为模板进行PCR扩增及克隆。该方法用于低载量HBV全基因组的扩增、克隆和序列分析，可为进一步分析低载量HBV的基础和临床研究提供有效帮助。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 低载量 乙型肝炎 病毒 基因组 克隆 方法 | ||
【主权项】：
一种低载量乙型肝炎病毒全基因组克隆的方法，采用特异性引物将血清中提取的乙型肝炎病毒DNA进行巢式PCR反应；将扩增出乙型肝炎病毒的CP‑S区和RT‑X区两个片段分别进行酶切后，将二者连接成完整的病毒全基因组，再以连接产物为模板用PCR方法扩增该全基因组后，进行克隆；所述CP‑S区为nt 1777～nt 274，RT‑X区为nt 3194～nt 1797；所述特异性引物的序列如下：SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：2是CP‑S区的外引物序列；SEQ ID NO：3～SEQ ID NO：4是RT‑X区的外引物序列；SEQ ID NO：5～SEQ ID NO：6是CP‑S区的内引物序列；SEQ ID NO：7～SEQ ID NO：8是RT‑X的内引物序列。
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