[发明专利]人骨髓多能干细胞的体外扩增和向多巴胺能神经元定向分化的方法无效
| 申请号： | 201010241901.1 | 申请日： | 2010-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN101935635A | 公开（公告）日： | 2011-01-05 |
| 发明（设计）人： | 刘厚奇;范力星 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 上海德昭知识产权代理有限公司 31204 | 代理人： | 丁振英 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及干细胞及细胞定向诱导分化领域。帕金森病可使用细胞移植疗法进行治疗，治疗难点在于合适的干细胞细胞来源及稳定诱导干细胞分化的条件。骨髓是自体干细胞的重要来源，对骨髓中混杂细胞进行分离和纯化培养，获得骨髓来源的多能干细胞，并摸索其向多巴胺能神经元的分化条件，对于帕金森病的临床治疗具有重大意义。本发明提供一种人骨髓多能干细胞的体外扩增方法，使用多种培养成分作为培养基和克隆化培养方法，从人骨髓中获得多能干细胞，体外可稳定增殖，表达相关多能性标记物。本发明还提供了人骨髓多能干细胞定向高效安全地分化为多巴胺能神经元样细胞的方法。经过RA+bFGF和SHH因子分期诱导法诱导分化两个周期后，该骨髓来源的多能干细胞可体外向DA神经元样细胞分化。 | ||
| 搜索关键词： | 骨髓 多能 干细胞 体外 扩增 多巴胺 神经元 定向 分化 方法 | ||
【主权项】：
一种人骨髓多能干细胞的体外扩增方法，其特征在于采用人体骨髓，加入扩增培养基均匀分散后，剩余单个核细胞以100ng/ml纤连蛋白处理培养皿底，采用克隆化的纯化方式，获得可稳定增殖20代以上的骨髓多能干细胞，所述的扩增培养基成分由60％的DMEM、40％的MCDB、1％的ITS、4.7ug/ml LA、luM的LAA、1mg/ml的HAS、1％的Pen/Strep、2％的FBS、lnM的Dex、10ng/ml的EGF和10ng/ml的PDGF组成。
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