[发明专利]松材线虫快速检测方法及试剂盒无效

专利信息
申请号: 201010228975.1 申请日: 2010-07-16
公开(公告)号: CN101921844A 公开(公告)日: 2010-12-22
发明(设计)人: 马新颖;徐志宏;陈为民 申请(专利权)人: 浙江农林大学;杭州市森林和野生动物保护管理总站
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 33200 代理人: 周烽
地址: 311300 *** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 一种松材线虫快速检测方法及试剂盒,松材线虫特异性引物序列如序列表的序列1和2所示,线虫DNA提取液中各原料及浓度是:200mmol/L Tris-HCl、200mmol/L NaCl、100mmol/LEDTA、20mg/mL SDS、20μL/mLβ-巯基乙醇和200μg/mL蛋白酶K;PCR反应用液为:10×PCR缓冲液、10mM dNTP、20μMSCXC-F、20μM SCXC-R、5U/μL Taq DNA聚合酶、松材线虫阳性DNA和重蒸水;本试剂盒及其检测方法对松材线虫的成虫、幼虫及卵都能检测,且能分辨出松材线虫与拟松材线虫,具有检测快速、简便和准确的优点。
搜索关键词: 松材线虫 快速 检测 方法 试剂盒
【主权项】:
一种松材线虫快速检测试剂盒,包括特异性引物、DNA提取液、松材线虫阳性DNA及PCR反应用液,其特征是:1)松材线虫特异性引物序列:SCXC F:5’ AAAATAAATGTAAAATGAATG 3’;SCXC R:5’ GTGCTCGTCACGATGATG 3’;2)线虫DNA提取液中各原料及其浓度是:200mmol/L Tris HCl、200mmol/L NaCl、100mmol/L EDTA、20mg/mL SDS、20μL/mLβ 巯基乙醇和200μg/mL蛋白酶K;3)PCR反应用液为:10×PCR缓冲液、10mM dNTP、20μM SCXC F、20μM SCXC R、5U/μL Taq DNA聚合酶、松材线虫阳性DNA和重蒸水。
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