[发明专利]受激发子Nep1诱导的过敏性细胞死亡的调控基因的克隆方法无效

专利信息
申请号: 201010210775.3 申请日: 2010-06-28
公开(公告)号: CN102296060A 公开(公告)日: 2011-12-28
发明(设计)人: 张正光;王源超;郑小波 申请(专利权)人: 南京农业大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 210095 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 采用病毒诱导基因沉默技术从以PVX病毒载体建立的本氏烟(Nicotiana benthamiana)cDNA文库中筛选受激发子Nep1诱导的过敏性细胞死亡的调控基因的方法,其中以农杆菌Gv3101为宿主、利用PVX病毒表达载体构建单克隆的本氏烟cDNA文库,采用牙签刺伤法或注射接种法接种本氏烟,从上述单克隆文库中筛选能使激发子诱发的过敏性细胞死亡表型发生改变的阳性克隆,然后对上述阳性克隆进行序列测定和分析。
搜索关键词: 激发 nep1 诱导 过敏性 细胞 死亡 调控 基因 克隆 方法
【主权项】:
一种受激发子Nep1诱导的过敏性细胞死亡的调控基因的筛选方法,其特征在于包括以下步骤:(1)以农杆菌为宿主,利用病毒表达载体构建单克隆的本氏烟cDNA文库;(2)将上述单克隆的本氏烟cDNA文库的培养菌液注射接种本氏烟的叶片;(3)然后将激发子Nep1注射处理上述基因沉默的烟草;(4)筛选基因沉默后激发子诱导的过敏性细胞死亡表型发生改变的克隆。
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