[发明专利]用于检测EGFR基因拷贝数和7号染色体倍性的试剂有效
申请号: | 201010168862.7 | 申请日: | 2010-05-11 |
公开(公告)号: | CN101899504A | 公开(公告)日: | 2010-12-01 |
发明(设计)人: | 郭兴中;董正伟;方国伟;郭尧 | 申请(专利权)人: | 合肥艾迪康临床检验所有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N21/64 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人: | 徐关寿 |
地址: | 230000 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于检测EGFR基因拷贝数和7号染色体倍性的试剂,所述试剂包括用于检测EGFR基因拷贝数的荧光探针RP11-339F13和用于检测7号染色体倍性的荧光探针RP11-144H20;其中,RP11-339F13为覆盖EGFR基因全长的BAC克隆,用罗丹明荧光素标记;RP11-144H20为7号染色体着丝粒特异的BAC克隆,用异硫氰酸荧光素标记。使用本发明试剂可以快速、简便地检测细胞内EGFR基因拷贝数及7号染色体倍性,有助于药物敏感性和预后的判断,对指导于非小细胞肺癌等肿瘤分子靶向药物酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)的使用具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 用于 检测 egfr 基因 拷贝 染色体 试剂 | ||
【主权项】:
1.用于检测EGFR基因拷贝数和7号染色体倍性的试剂,其特征在于,所述试剂包括用于检测EGFR基因拷贝数的荧光探针RP11-339F13和用于检测7号染色体倍性的荧光探针RP11-144H20;其中,RP11-339F13为覆盖EGFR基因全长的BAC克隆,用罗丹明荧光素标记,其末端序列如下:(1)RP11-339F13正向序列(Forwardsequence):cagagacaggagcggaggcttctcctggtgaccactctgcttaaaaacttcatcagatccgtagtttcagagcccccctgaaccccatcccttacctctaccagttgcaggtgggtctctggggtggggctgccctccccaccagcaccccaagggctaaaaggttgaggggagaacaccatcatttgtacagggggatcctggaagatgaggcctgagaaagccctgcggggcccctcaccttctccctagctgtggccaagagtgtctggccttgcctgcctcaggaccagcccaaagtggaggtgagaggtgagccccagcccccaggggaagggtgatggtggtcttggtctcagcatggttctggtagaggtgggttattttgaagatgatgaaccttaagcctctttctgatcttgctttaaataaatacttctgaacaacagcaacaacagaatagtgttgataggaaagccctccactccaccagaaccacgcggccttctcgtcctcccctcctccacttccttcctaagtcactgctccatgagctcttccacaggagatttacaaaatagaacacaaacaatccagttcccgcctctcactctgaactcctcccaagactcgtggggtgcggcagcccctgggaacacccagcccttcaaggtcaaacacagcccccgcccctcactctggggtaccctgccagaataagccccgacagccatgtggagcagagccttc(2)RP11-339F13反向序列:ccgcccggccagccgccccgtccgggagggaggtgggggggtccaaggtaaggaaggccctagagtctaggaagagactggccagtgcattaaccattgtagtgtaatggatttgatgttactttatgctcacaagttggacacacacacagggacccagatcaaattggaggggaaggtcaaagtcagcttcccaaaggaactgaagcttagactgatttttaaaggctgagttaaaataaactgggtaaaaataaagaaggaaagagaaaagcaaatgtaaaatatctgtgcagcatgaagtagcaaaatatattcagagaatgtaagaagctgaaatgagggcctcaactaagcgtgggaatgcagatggtgacatagcaatgctgaggtaggctccccaggaccgaggccggcttgttgcggggagaggggaggggcactctaggatgatctctggcgtaagcagcaggtaacgcggtgccaggacatggctgagttttacataaacatttgttcaagcaaatatgggatcattcactgaaacggagaattcaaagtgaggtctagatttggtggcaagatacaactgattcgaggttaggaaaggagagttggaggaacaggaggaagcggcctctcatctgcaaaccctgagttcctggaacacttgtttgttagggagggaagtgtggcccagccacaatcctttgaacatcttcctcttccatcctctgggttctgcatttc;RP11-144H20为7号染色体着丝粒特异的BAC克隆,用异硫氰酸荧光素标记,其末端序列如下:(3)RP11-144H20正向序列:gaattcagcagtttggaaacactctttttgtcaattctgcaagtcgacatttgggaggtcattgagctcaaaggtgaaaaagtgaatatcccataataaaaagtagaagaaatctattgcattgaggcctatggtgaaagaggaaaaatattcagaaaaaatctagaaagaagctttctgagaaactgctttgtgatgtgtgcattcacctaacagagttaatcctttcagtgaaatcagcagtttgcaaacactgttttcatccattctgtaaaaggacatttgctagttcattaacaccaatggcaaaaaagcaaatatcactggagaaaaactagaaggaatctatctgagaaaccactttttgatgtgtgcattcacctcgcagagttaaacttttattttcatggagcaggttgtaaacactctttttgtagaaactgcaaagggatatttgggagcgcatttaggcttatggtaaaaaggaaatatcttaagttgaaaactagaaacaagctttctgagaaacttctttgtgatgtgcacattcatatcacagagtaaaacctttactttggattcagtagtttggaagccctgttgttgtagaatgtgtgaagggatacttgggagctcattgaggccatccggtaaaaagtgaatatcccaggataaaaactaaaaggaaacaatctgagaaaccactatgtcatgtgtgcattcacctcgcagaattaaaactttcttttc(4)RP11-144H20反向序列:ctgagaattcttccgtctagcattcaatgaagaaatcccgtttccaacgaaggcctcaaacaggtccatatttccacttgcagactttacaaacagtgtgtttccaaactcctctatgaaaagaaaggttaaactctgtgagttgaacgcacacatcacaaagcactttctgagaatgattctgtctggttattatacgaagatatttccttttctgcaattgtcctcaaatcgcttgaaatctccacctgaaaatgccacagcaagagtgtttcaaatctgctctctctaaagcaaggttcaactctgtgagttgaatacacacaacacaaaaaagttcctgagaactcttcttagtctagcatgaaaggaagaaaccccgtttgcaacgaagccctcaaagaggtccaaatatccacttgcagacataacaagcagagtgtttctaaactgctctaagaaaagaaaggttaaactctgtgagttgaaggcacacatcacaaagtagtttctgagaatgattctgtctagtttttatttgaagatatttccttttctactgttggcatcaaatcgcttgaaatctccacttgcaaattccacaaaaagagtgtttcaaatctgctctgtgtaaagggacgttccactctgtgagttgaatacacacagcacaaagaagttactgagaattcttctgtctagcatgaaatgaagaaatcccgtttccaacgaaggcctcaatgcggtcca。
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