[发明专利]一种油葵的基因转化方法无效
申请号: | 201010134462.4 | 申请日: | 2010-03-29 |
公开(公告)号: | CN101787372A | 公开(公告)日: | 2010-07-28 |
发明(设计)人: | 杨静慧;刘艳军;张伟玉 | 申请(专利权)人: | 天津农学院 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00 |
代理公司: | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人: | 王来佳 |
地址: | 300384*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种油葵的基因转化方法,步骤是:(1)取生长健壮的油葵试管苗组织作为外植体;(2)取农杆菌C58C1的一个单菌落,接种到LB液体培养基中过夜振荡培养,待其OD值为0.2-0.6时,取出并浸染油葵试管苗组织外植体;(3)将上述浸染过的油葵试管苗外植体放在含有2-5mg/L除草剂的分化培养基上,分化培养,每0-14天继代一次,生成转化苗;(4)将上述除草剂筛选的转化苗转入生根培养基,待转化苗苗长到2-5cm高时即可移栽到花盆中。本发明建立一套油葵的基因转化方法,分别对筛选标记(除草剂)浓度、不同转化外植体的选择、采用不同的继代时间进行了明确,并且获得了最高转化效率,为油葵的各种基因转化奠定基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 基因 转化 方法 | ||
【主权项】:
一种油葵的基因转化方法,其特征在于:其转化方法的步骤是:(1)取油葵试管苗组织作为外植体;(2)取农杆菌C58C1的一个单菌落,接种到LB液体培养基中过夜振荡培养,待其OD值为0.2-0.6时,取出并浸染油葵试管苗组织外植体;(3)将上述浸染过的油葵试管苗外植体放在含有2-5mg/L除草剂的分化培养基上进行再生芽的诱导,该分化培养基为MS+KT0.25mg/L+IAA0.5mg/L,外植体长度为2-3cm,接种50-150块,培养条件为20-30℃、20-26h光照、光强1500-2500lx,从接种后每0-14天继代一次,生成转化苗;(4)将上述除草剂筛选的转化苗转入生根培养基,其生根培养基的构成为1/2MS+IAA0.5mg/L,待转化苗苗长到2-5cm高时即可移栽到花盆中。
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