[发明专利]一种豇豆重花叶病毒反转录PCR分子检测试剂盒及其检测方法无效
| 申请号： | 200910264108.0 | 申请日： | 2009-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN101824485A | 公开（公告）日： | 2010-09-08 |
| 发明（设计）人： | 李彬;粟寒;吴翠萍;李艳华;陈贯源;郑斯竹;杨静;安榆林 | 申请（专利权）人： | 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人： | 王荷英 |
| 地址： | 210001*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种豇豆重花叶病毒反转录PCR分子检测试剂盒及其检测方法，属于生物技术领域。试剂盒包括引物CPSMVf和CPSMVr；CPSMVf为5’-ACACARGTNMGNCCNGATAC-3’，R＝A或G，N＝I，M＝A或C；CPSMVr为5’-GCTACNGGACTRCTRCTCA-3’，N＝I，R＝A或G。检测步骤：提取样品RNA，以CPSMVr为引物进行反转录反应；以反转录产物为模板，CPSMVf和CPSMVr为引物进行PCR反应，并进行电泳，若样品RNA在356bp处有特异性扩增条带，则该样品感染了CPSMV。该方法具有快速、操作简便，特异性好、重复性高等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 豇豆 花叶 病毒 转录 pcr 分子 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】：
一种豇豆重花叶病毒反转录PCR分子检测试剂盒，包括如下试剂：dNTP混合物、无RNase的ddH2O、5×RT Buffer、RNase抑制剂、反转录酶、10×PCR Buffer、MgCl2溶液、上游引物CPSMVf、下游引物CPSMVr、Taq DNA聚合酶和ddH2O；所述CPSMVf序列为5’-ACACARGTNMGNCCNGATAC-3’，其中R＝A或G，N＝次黄嘌呤核苷酸，M＝A或C；所述CPSMVr序列为5’-GCTACNGGACTRCTRCTCA-3’，其中N＝次黄嘌呤核苷酸，R＝A或G。
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