[发明专利]合成油和植物油基润滑油产品的生物降解测试方法

摘要

本发明涉及一种合成油和植物油基润滑油产品的生物降解测试方法。采集获得的活性污泥，经过驯化后接入到合成油和植物基润滑油降解培养基中，经过7天连续恒温摇床培养，测定降解培养基中的微生物菌液生物量和液相培养基中的润滑油有机物残留量作为评定合成油和植物基润滑油生物降解率的评定方法和标准。本发明是一种操作简便、数据再现性和重复性稳定的合成油和植物基润滑油生物降解评定方法，适用于各种规格和粘度级别的可生物降解润滑油。该方法应用到蓖麻基全合成高性能润滑油产品的生物降解测试试验中，并以文献报道中生物降解率在96％左右的蓖麻油作为参比油，测得的蓖麻油生物降解率为97％，蓖麻基全合成高性能润滑油的生物降解率达到了85％。

主权项

1.一种合成油和植物油基润滑油产品的生物降解测试方法，其特征在于它包括的步骤：1)采集来自污水处理厂的活性污泥，经过24-48小时曝气处理后，溶解于无菌水中，搅拌，得到菌悬液，吸取该菌悬液于液体驯化培养基中，置于26～28℃恒温箱中于180～200r/min下避光振荡培养3～5天，待培养基变混浊后吸取该菌液反复接种于成分、浓度都相同的驯化培养基中，每次接种量为5mL/100mL培养基。仍按照上述培养条件进行培养。驯化后的优势菌为假单胞菌属(Pseudomonas)、梭状芽孢杆菌属(Clostridium)、分枝杆菌属(Mycobacterium)等好气异养型细菌，总活菌浓度为1.0×10⁵～1.0×10⁶个/mL。2)种子培养生长曲线的确定：将驯化后生长比较旺盛的菌种于种子培养基中培养，培养温度为37℃，采用可见分光光度计在660nm波长下测定混合菌液OD值，绘制生物降解混合菌液的生长曲线，选择对数生长期活跃的新生代菌液接种于降解培养基中的时间；3)根据种子培养生长曲线选择生长旺盛的菌液进行润滑油的生物降解试验，从种子培养基中吸取混合菌液，接入到准备好的需要添加菌液的润滑油生物降解培养基矿物营养液中，置于37℃，转速为200r/min的恒温振荡器中，暗室内进行生物降解培养7天；生物降解试验包括：中性瓶：100mL矿物基营养液+1mL种子菌液；测试瓶：100mL矿物基营养液+1mL种子菌液+2g合成油和植物基润滑油；参比测试瓶：100mL矿物基营养液+1mL种子菌液+2g参比油；毒化瓶：100mL矿物基营养液+2g合成油植物基润滑油；参比毒化瓶：100mL矿物基营养液+2g参比油；4)接入混合菌液的生物培养基，在经过7天培养后，用1％的盐酸水溶液和20gNaCl溶解，采用超声波细胞破碎仪将培养基中的微生物细胞壁破碎；对预处理后的样品分别进行TC(总碳)和IC(无机碳)的测定，依据TOC(总有机碳)计算公式(TOC＝TC-IC)求得TOC值。根据培养前后TOC值的变化情况，求得待测样品和参比样品的TOC降解率，分析样品的生物可降解性。5)、生物降解率测定：用显微镜观察水质润滑油生物降解培养基中的微生物菌群生物量变化率，可作为评定其润滑油被微生物利用的一个定性指标；采用总有机碳分析方法，检测水质培养基中的有机物变化率作为其生物降解的定量指标，计算公式如下：P：毒化瓶中残余油含量，％(平均值)T：测试瓶中残余油含量，％(平均值)。