[发明专利]生长快成活率高牙鲆优良品系的选育方法

摘要

一种生长快成活率高牙鲆优良品系的选育方法，其技术方法包括：牙鲆育种群体的培育和生殖调控，精子冷冻技术辅助家系建立，家系的培育和标准化，数量性状的测定和分析，遗传参数估计，优良家系筛选和利用异源冷冻精子诱导牙鲆雌核发育构建优良品系。本发明可选择培育出生长速度快、成活率高牙鲆养殖新品系，筛选出生长快、成活率高的优良牙鲆家系共4个(0703、0719、0750和0751)，利用冷冻保存的鲈鱼精子，诱导建立了雌核发育的牙鲆优良品系7个(0920、0921、0927、0938、0939、0946和0947)。该技术方法可用于牙鲆养殖新品种培育，解决海水养殖鱼类牙鲆生长慢、成活率低的问题，可提高牙鲆养殖经济效益。

主权项

一种生长快成活率高牙鲆优良品系的选育方法，其特征在于它的方法，包括：牙鲆育种群体的培育和生殖调控、精子冷冻技术辅助家系建立、家系的培育和标准化、数量性状的测定和分析、遗传参数估计、优良家系筛选、利用异源冷冻精子诱导牙鲆雌核发育构建优良品系；将事先构建的抗病牙鲆、日本牙鲆、黄海牙鲆利用电子微粒注射标记，集中培育达2-3龄，年培育温度控制在13-25℃，投喂人工配合饲料；每年2-5月繁殖季节水温控制在14-17℃，光照时间15h，光照强度1500-2000lux，连续照射1-2月，水流交换量为6-7m3/h，饲喂添加维生素E的野杂鱼培育，达到性成熟时，人工采集成熟牙鲆卵子和精子，镜检活力在70％以上的精子冷冻保存在液氮中，建立牙鲆精子冷冻库；人工繁殖时将冷冻精子在37℃水浴中解冻，镜检活力在70％以上者与卵子干法受精，其卵精比例为100ml∶1ml；在3个育种群体间或群体内以1雄多雌或1雌多雄的交配方式，建立全同胞或半同胞家系；210d前的家系培育在3m3水缸中，水流量调控在1-5m3/h之间，水温14-25℃；分别在鱼苗生长至15、50、90、150、210d左右对每个家系的养殖数量进行标准化，标准化鱼苗数量分别为10000、1000、500和200尾，210d分别利用红、黄、橙3种荧光颜料，在鱼苗腹部选择背前、背中、背后、腹后和腹中5个位置对家系选择个体进行标记，并集中养殖在1-2个30m3水池中；家系生长至90、210、510、720d几个时间段对其体长、体重和成活率进行测定，利用方差分析、多重比较、绝对增重和成活率比较分析家系生长情况；采用线性混合模型对测量性状遗传参数进行估计，体长和体重的狭义遗传率分别为0.20和0.26(P＜0.01)，广义遗传率分别为0.31和0.34(P＜0.01)；通过以上方法筛选出生长快、成活率高牙鲆家系4个：分别为0703、0719、0750、0751号家系。将筛选家系培育成熟，可产出成熟卵子；将冷冻保存的鲈鱼精子在37℃水浴中解冻，用MPRS以1∶10的比例稀释鲈鱼精液，后在40000μJ/cm2紫外线下照射，使其遗传物质失活，加入牙鲆卵中进行干法授精，受精卵与精液体积比为100ml∶0.4ml，授精3min后浸入2～4℃海水中冷休克处理45min，诱导牙鲆卵雌核发育，然后将卵放入17℃海水孵化，建立生长快、成活率高牙鲆品系，共建立7个优良品系，分别为0920、0921、0927、0938、0939、0946、0947号品系。