[发明专利]诊断沙眼衣原体、淋球菌及解脲支原体感染的荧光PCR方法

摘要

本发明涉及一种用于诊断沙眼衣原体(CT)、淋球菌(NG)及解脲支原体(UU)感染的荧光PCR(聚合酶链式反应)检测方法，属于体外核酸诊断领域。本发明包括一个以荧光PCR技术为基础的多重聚合酶链式反应(PCR)体系，包含针对CT/NG/UU的正、反向引物和荧光探针，在适合的PCR条件下可在一个反应管中同时检测CT/NG/UU等3种病原体的DNA。本发明可以简便快速地在临床样品中诊断诊断CT/NG/UU感染，灵敏度高，特异性强，对相关的泌尿生殖道感染的早期防治、阻断传染源、减少相关病原体的感染均有重要的临床价值。

主权项

1.一种诊断沙眼衣原体(CT)、淋球菌(NG)及解脲支原体(UU)感染的荧光PCR方法，包括以下部分：(1)与CT/NG/UU DNA互补的寡核苷酸序列用于PCR扩增临床样品中获得DNA的引物；在这里，引物序列包含：(a)一个能与CT基因对应的靶序列上游第一个位点杂交的正向引物；(b)一个能与CT基因对应的靶序列下游第二个位点杂交的反向引物；(c)一个能与NG基因对应的靶序列上游第一个位点杂交的正向引物；(d)一个能与NG基因对应的靶序列下游第二个位点杂交的反向引物；(e)一个能与UU基因对应的靶序列上游第一个位点杂交的正向引物；(f)一个能与UU基因对应的靶序列下游第二个位点杂交的反向引物；(g)正向引物和反向引物不限于本说明书序列表明的序列。(2)用于检测CT/NG/UU的荧光标记一个或多个寡核苷酸序列探针，该探针能与位于靶序列中上述第一和第二个位点杂交之间的序列杂交。探针序列可以是SEQ ID No.1-3的序列或其互补序列。还可包括由所列序列或其互补序列衍生出来的差别不大于8个碱基的寡核苷酸序列。(3)对取得的样品进行了PCR扩增，其特征在于包括一对或多对引物及探针，以CT、NG或UU DNA作为模板，一个反应体系中扩增一个或多个DNA目标靶序列片段。通过检测PCR反应体系中一个或多个不同荧光信号的变化，确定样品中是否感染CT、NG、UU或混合感染，以及其含量。