[发明专利]临床体外酶法钾测定试剂

摘要

尿素氨基水解酶(Urea amidolyase UAL；EC 3.5.1.45)在ATP、HCO₃^-、Mg⁺参与下，水解尿素生成NH₄⁺、HCO₃^-、ADP和Pi。K⁺是UAL酶的激活剂，其激活速度与K⁺浓度成正比。偶联一个辅助反应，将UAL酶生成的NH₄⁺与α-酮戊二酸、NADH和谷氨酸脱氢酶(Glutamate dehydrogenase，GLDH)反应，生成谷氨酸盐和NAD⁺，在340nm波长下，NADH的下降速率与K⁺的浓度成正比。通过NADH下降速率求出K⁺的浓度。本发明将以上反应实际应用到临床体外测定钾试剂中，并提出最佳双试剂成份组成，使得试剂稳定性、准确度和精密度达到最理想状态。

主权项

1.临床体外酶法测定钾的方法，包括如下步骤：(1)尿素氨基水解酶(UAL)在三磷酸腺苷(ATP)、HCO₃^-、Mg⁺参与下水解尿素(Urea)生成NH₄⁺、HCO₃^-、二磷酸腺苷(ADP)和磷酸(Pi)，其反应式如下：(2)生成的NH₄⁺加上α-酮戊二酸、还原型辅酶I(NADH)在谷氨酸脱氢酶(GLDH)的作用下生成谷氨酸盐(Glutamate)和辅酶I(NAD⁺)，反应式如下：(3)根据K⁺的浓度与K⁺的激活速率成正比，而K⁺的激活浓度与反应式(II)的NADH下降速率成正比，在340nm波长下测定NADH的下降速率，由NADH下降速率推出激活剂K⁺的浓度。