[发明专利]苦参组织培养与快速繁殖方法

摘要

提供苦参组织培养与快速繁殖方法，以苦参茎尖、地上茎和地下茎为外植体进行组织培养，成功诱导出试管苗。将外植体接种在MS+2，4-D0.2mg/L+6-BA 0.8mg/L培养基上，诱导率高达100％，有大量愈伤组织产生，颜色为淡绿色，生长较快；用MS+IBA0.1mg/L+6-BA1.5mg/L诱导从生芽增殖及分化时，增殖系数可达7.3，芽分化系数达8.3倍；用1/2MS+IBA1.5mg/L或1/2MS+NAA1.0mg/L进行生根培养，生根率高达95％，平均根数6条以上，在一定的温度和湿度条件下培养，移栽成活率可达87％以上。

主权项

1、苦参的组织培养方法，包括外植体消毒、诱导、继代、生根培养，移载步骤，取苦参茎尖或地上茎或地下茎，洗净，75％的酒精处理30s，0.1％升汞浸泡8min，再用无菌水清洗4～5次，晾干，切成每段0.5cm带1～2个芽，接入MS+2，4-D 0.2mg/L+6-BA 0.8mg/L中进行愈伤组织诱导，将愈伤组织分割成3～5mm2的小段，插入MS+IBA0.1mg/L+6-BA1.5mg/L培养基中，以每25d一个周期进行继代培养，进行从生芽增殖及分化，然后将高3cm的再生芽从芽簇上切下，接入生根培养基1/2MS+IBA1.5mg/L或1/2MS+NAA1.0mg/L中，生根后的植株移栽到温室1∶1的腐殖土+蛭石中；上述培养基中蔗糖质量浓度，除生根培养为15g/L外，均为30g/L，琼脂质量浓度为8g/L，培养基pH 5.8～6.2，配制好的培养基在1.05MPa121℃条件下灭菌20min；培养条件为温度22～28℃，每日光照时间10～12h，光照强度1500～3000Lx；在弱光500～1000Lx条件下诱导不定根。