[发明专利]人白血病-NOD/SCID小鼠髓外浸润模型及其制备方法

摘要

本发明涉及一种人白血病-NOD/SCID小鼠髓外浸润模型的制备方法，包括以下步骤：一、白血病人骨髓单个核细胞制备，二、NOD/SCID小鼠预处理，三、模型建立，四、模型鉴定。本发明率先采用了尾静脉注射白血病人白血病人骨髓单个核细胞的方式建立人白血病-NOD/SCID小鼠髓外浸润模型的方法，且制备的白血病小鼠髓外浸润模型成功率高，存活时间长，可以为白血病髓外浸润机制研究，白血病药物筛选，基因和分子靶向治疗提供新的动物模型。

主权项

1.一种人白血病-NOD/SCID小鼠髓外浸润模型的制备方法，包括以下步骤：1)白血病人骨髓单个核细胞制备：选取急性白血病人或慢性粒白血病急变病人，常规无菌采集骨髓5ml，肝素抗凝，加入5ml淋巴细胞分离液，1800r/min水平离心10min，移入超净工作台，吸取中间白色单个核细胞悬浮层，移入另一支离心管中，加入5mlPBS液，水平离心1000r/min，10min；倒去上清，再次加入5mlPBS液，水平离心1000r/min，10min，弃去上清，0.9％的生理盐水调匀细胞，2％台盼蓝计数活细胞，将活细胞终浓度调至5×107/ml；2)NOD/SCID小鼠预处理：SPF级NOD/SCID小鼠，5至6周龄，饲养于SPF级层流室，标准颗粒饲养，饮水酸化处理，垫料及一切与鼠接触物品均灭菌处理，接种前将小鼠置于无菌透气木盒中，处罩无菌消毒巾，在137cs源环境下照射270cGy，预处理后24h内接种白血病人单个骨髓核细胞，对小鼠所有操作均在无菌层流室内进行；3)模型建立：将调整好浓度的白血病人白血病人骨髓单个核细胞尾静脉注射于预处理后的NOD/SCID小鼠，每只注射剂量为0.2ml，建议人白血病-NOD/SCID小鼠髓外浸润模型；4)模型鉴定。