[发明专利]一种生产重组高活性锰超氧化物歧化酶的方法有效
| 申请号: | 200910055002.X | 申请日: | 2009-07-17 |
| 公开(公告)号: | CN101955918A | 公开(公告)日: | 2011-01-26 |
| 发明(设计)人: | 李素霞;袁勤生;陈车生;吴梧桐 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
| 主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12R1/19 |
| 代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静;范征 |
| 地址: | 20023*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | 本发明涉及一种生产重组高活性锰超氧化物歧化酶的方法。所述方法在重组可溶性表达锰超氧化物歧化酶后,将细胞上清进行热变性,之后纯化经过热变性的蛋白溶液,纯化产物用适当浓度的锰离子进行激活。所述方法可获得高活性的锰超氧化物歧化酶。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 生产 重组 活性 超氧化物歧化酶 方法 | ||
【主权项】:
一种生产锰超氧化物歧化酶的方法,其特征在于,所述方法包括:(1)重组表达锰超氧化物歧化酶,获得含有可溶性表达的锰超氧化物歧化酶的细胞;(2)破碎步骤(1)获得的细胞,离心获取上清;(3)将步骤(2)获得的上清进行热变性,热变性温度为75±2℃,热变性时间为10±5分钟;热变性后冷却,离心获取上清;(4)纯化步骤(3)得到的上清,获得纯化的锰超氧化物歧化酶;和(5)在纯化的锰超氧化物歧化酶中加入锰离子,获得激活的锰超氧化物歧化酶。
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