[发明专利]一种用于革兰氏阳性菌的高效转座系统

摘要

本发明属微生物领域，涉及一种用于革兰氏阳性菌的高效转座系统pBTn，采用温度敏感性质粒pBT2作为载体，其成功转入目的菌中后，通过升高培养温度而被去除；温度敏感性质粒中插入两端带有重复序列的红霉素的耐药基因，在红霉素的耐药基因和来源于mariner真核转座子的转座酶间插入来源于pTX15的启动子，该启动子在葡萄糖存在下被遏制表达，在无葡萄糖，木糖存在可活化，能有效地控制转座酶表达的时间。本发明建立的转座子突变文库无明显插入热点，具有高度随机性和单一性插入到革兰氏阳性菌基因组的特点。实用性明显高于目前被广泛使用于原核生物的转座系统Tn551或Tn917。

主权项

1、一种用于革兰氏阳性菌的高效转座系统，其特征是包括温度敏感性质粒，药物耐药基因和转座酶，其中，温度敏感性质粒作为载体，温度敏感性质粒中插入药物耐药基因，耐药基因和转座酶之间插入特定的启动子，使有效地控制转座酶表达的时间，无明显基因的插入热点，命名为pBTn。