[发明专利]一种鸟嘌呤核苷的生产方法

摘要

一种鸟嘌呤核苷的生产方法，它由摇瓶液体菌种培养、葡萄糖液生产、鸟苷发酵液制取和鸟苷提取精制四大工艺过程组成，选用了遗传稳定的保藏菌种TA208-IMPD，碎米经浸泡、磨浆、液化、压滤和糖化制取葡萄糖液，在发酵过程中采用流加葡萄糖液等新工艺，鸟苷发酵液经微滤膜除菌、粗品鸟苷结晶、超滤膜脱色除杂和分离烘干生产合格鸟苷，克服了传统工艺育种技术落后、菌种产苷不高、发酵周期长、转化率及提取综合收率低等不足，菌种同步生产率和产苷水平高，葡萄糖液产品稳定，发酵产苷水平高，鸟苷产品纯度可达99％以上，收率达80％以上。

主权项

1、一种鸟嘌呤核苷的生产方法，其特征是：(1)、摇瓶液体菌种培养：①选用枯草芽孢菌TA208-IMPD为保藏菌种；②将葡萄糖、无机盐、有机氮等配制的初级菌种培养基装入茄瓶；③接入保藏菌种，接种量为0.1％，在温度36℃条件下静置培养24h后获初级菌种；④将初级菌种放入摇瓶，接种量为0.1％，在往复式摇床上培养，转速160转/分，温度36℃，时间周期10-12h，当菌种镜检及OD等各项指标达标后即获摇瓶液体菌种。(2)、葡萄糖液生产：①将碎米在浸泡罐内浸泡时间4h，维持温度40℃；②用砂磨机将碎米磨成米浆，其细度为30目，浓度达18Be°-20Be°；③将米浆用液化喷射器在105℃-108℃条件下高温液化，然后进入维持罐保温维持80-120min；④将液化料液经板框压滤机压滤，压滤温度80℃左右，压力≤0.25Mpa；⑤将液化液泵入糖化罐进行糖化，糖化温度保持为60℃，糖化周期33h-36h；⑥糖化后用板框压滤机压滤糖化液，得葡萄糖液；压滤温度60℃左右，压力≤0.25MPa。(3)、鸟苷发酵液制取：①将葡萄糖液、无机盐、有机氮等配制的二级菌种培养基经121℃左右、15min蒸汽灭菌后泵入二级种子罐，降温至36℃后，接入摇瓶菌种接种量为0.1％，同时将经过0.25-0.3Mpa压缩、过滤后的无菌空气输入二级种子罐，此时通风比1∶0.2-0.4v/V.min，pH6-8，压力0.03-0.1MPa，培养10h-12h，经菌种镜检及OD等各项指标达标后即获得二级菌种；②将葡萄糖液、无机盐、有机氮配制的发酵培养基经121℃左右、15min蒸汽灭菌后泵入发酵罐，降温至36℃左右后接入二级菌种，接种量为10％；同时在上述①中保压无菌空气输入的条件下将经118℃左右、10min蒸汽灭菌后的40-60g/dL葡萄糖液进行流加；此时通风比为1∶0.2-0.8v/V.min，pH6-8，压力0.03MPa-0.1MPa，发酵50h-60h；当产苷达到38g/L、转化率20％时，即获得鸟苷发酵液。(4)、鸟苷提取精制：①将鸟苷发酵液送入提取储料罐，加热至60℃左右，用硫酸调PH值为2-4，经微滤膜除菌后送入粗品鸟苷结晶罐搅拌降温至4℃-10℃、调PH为7、时间10h-12h后获初级鸟苷晶体；微滤控制温度60℃左右，压力≤0.35Mpa，流速80L/m2.h——100L/m2.h；②将初级鸟苷晶体用板框压滤机分离后，控制过滤压力≤0.25Mpa；粗级鸟苷晶体重新溶解，并配置含量达到30g/L-45g/L的鸟苷溶液使其充分溶解；将充分溶解后的粗级鸟苷晶体经超滤膜进行脱色、除杂后送入精品鸟苷结晶罐搅拌降温后获得精级鸟苷晶体；超滤膜温度60℃左右，压力≤0.35Mpa，流速100L/m2.h——120L/m2.h；搅伴降温至4℃-10℃，时间10h-12h；③将精级鸟苷晶体用板框压滤机分离，压滤压力≤0.25Mpa；然后在温度70℃-80℃、真空度0.06Mpa-0.08Mpa的条件下进行真空干燥机烘干，最后包装获合格鸟苷产品。