[发明专利]东亚钳蝎蝎毒素AGAP的生产方法有效
| 申请号： | 200910032537.5 | 申请日： | 2009-07-01 |
| 公开（公告）号： | CN101591668A | 公开（公告）日： | 2009-12-02 |
| 发明（设计）人： | 曹鹏;卢悟广;王志刚;于杰淼 | 申请（专利权）人： | 江苏省中医药研究院 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12P21/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 210000江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于医药生物技术领域，具体涉及一种说重组蝎毒蛋白AGAP的生产方法。该方法是先利用重叠PCR技术获得带有His6标签的SUMO-AGAP融合基因；然后构建含SUMO-AGAP基因的重组表达载体；再将构建的表达载体转入宿主细胞进行表达；最后用物理方法或化学试剂裂解细胞，抽提重组融合蛋白质，His纯化融合蛋白，得到纯的SUMO-AGAP融合蛋白，进行酶切反应，释放出AGAP，经过一步纯化得到纯净的AGAP蛋白质。该方法大大提高了产率，节省成本，操作简便，且利用该方法生产的AGAP具有广泛的生物学活性，可以抑制多种肿瘤细胞的增殖，同时具有镇痛效应。 | ||
| 搜索关键词： | 东亚 钳蝎 毒素 agap 生产 方法 | ||
【主权项】：
1、一种东亚钳蝎蝎毒素AGAP的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：1)利用重叠PCR技术获得带有His6标签的SUMO-AGAP融合基因；2)构建含SUMO-AGAP基因的重组表达载体；3)将步骤2)中的表达载体转入宿主细胞进行表达；4)用物理方法或化学试剂裂解细胞，抽提重组融合蛋白质，His纯化融合蛋白，得到纯的SUMO-AGAP融合蛋白，进行酶切反应，释放出AGAP，经过一步纯化得到纯净的AGAP蛋白质。
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