[发明专利]猪肺炎支原体P97R1基因重组毕赤酵母及表达蛋白有效
申请号: | 200910027159.1 | 申请日: | 2009-05-22 |
公开(公告)号: | CN101565680A | 公开(公告)日: | 2009-10-28 |
发明(设计)人: | 刘茂军;邵国青;祝永琴;冯志新;王海燕;吴叙苏;甘源 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/81;C12P21/02;C12R1/84 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 | 代理人: | 张素卿 |
地址: | 210014*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种猪肺炎支原体P97R1基因重组毕赤酵母及表达蛋白,涉及生物蛋白制备领域。主要经基因的获得、表达载体的构建、目的蛋白的表达。利用PCR方法用设计的引物从猪肺炎支原体基因组DNA中扩增获得目的基因,再经酶切和连接克隆入酵母表达载体pPICZα-A,构建成分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A/P97R1,pPICZα-A/P97R1经Sac I酶切线性化后电转化入毕赤酵母菌株GS115。重组的毕赤酵母经甲醇诱导分泌表达P97R1蛋白。该方法制备的猪肺炎支原体P97R1蛋白较纯,且具有良好的免疫反应性,可用于猪肺炎支原体P97蛋白的研究、猪肺炎支原体免疫检测试剂盒和基因工程疫苗的研制。 | ||
搜索关键词: | 肺炎 支原体 p97r1 基因 重组 酵母 表达 蛋白 | ||
【主权项】:
1.猪肺炎支原体P97R1基因重组毕赤酵母,该重组毕赤酵母GS115/pPICZα-A/P97R1属巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris),于2009年4月13日保藏于中国典型培养物保藏中心,菌种保藏号为CCTCC NO:M209071。
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