[发明专利]一种快速检测海洋微藻脂肪酸含量的方法

摘要

本发明提供一种快速检测海洋微藻脂肪酸含量的方法，该方法是利用饱和KOH-CH3OH对微藻中脂类提取并造化，使提取过程和造化过程合二为一，再用HCl-CH₃OH进行甲酯化，获得脂肪酸，该组分经过提取、皂化和甲酯化后进行气相色谱质谱分析，具体步骤如下：(1)样品准备，(2)脂肪酸的提取、皂化和甲酯化，(3)脂肪酸的气相色谱检测条件。该方法具有操作步骤简单，节省时间，方法简单快捷，数据直观，增加了样品之间的可比性。

主权项

1. 一种快速检测海洋微藻脂肪酸含量的方法，其特征在于：利用饱和KOH-CH3OH对微藻中脂类提取并造化，使提取过程和造化过程合二为一，再用HCl-CH3OH进行甲酯化，获得脂肪酸，该组分经过提取、皂化和甲酯化后进行气相色谱质谱分析，具体步骤如下：(1)样品准备：称取8-10mg的藻粉样品；配制饱和KOH—CH3OH溶液和1moL/L的HCl—CH3OH溶液(使pH<2)；取15.00mg十九碳酸于10mL容量瓶中，用正己烷稀释至刻度配制成内标溶液；将混合标准溶液用正己烷稀释至100倍成标准溶液；(2)脂肪酸的提取、皂化和甲酯化：将藻粉样品置于螺口试管中→加50μL浓度为1mg/mL的十九碳酸内标和1mL的饱和KOH—CH3OH溶液→充氨气保护→于75℃水浴皂化10min→冷却后加2mL的1moL/L的HCl—CH3OH溶液(使pH<2)混匀→75℃水浴10min→冷却→加0.5mL正己烷和2mL蒸馏水→振荡→静置→取正己烷层用气相色谱质谱仪分析；(3)脂肪酸的气相色谱检测条件：a、色谱柱：HP-5MS石英毛细管柱(30m×0.25mm id×0.25um)；b、载气：氦气，流速为1mL/min，进样口温度250℃，传输线温度为300℃；c、电子能量70eV，离子源温度230℃，四极杆温度150℃’；d、升温程序为：初温50℃，10℃/min升到280℃；e、进样量1μL，分流进样(10∶1)，扫描方式为全扫描(Scan)方式；各脂肪酸组分含量由对应的峰面积和内标物的峰面积的比值求得。