[发明专利]一种活动性肺结核病的血清诊断模型的建立方法无效
申请号: | 200810184023.7 | 申请日: | 2008-12-09 |
公开(公告)号: | CN101424661A | 公开(公告)日: | 2009-05-06 |
发明(设计)人: | 吴雪琼;张俊仙;梁艳;阳幼荣;董梅;易宾;马瑞娟;卫华;梁建琴;陈红兵;张翠英;何菊芳;武红;李仲兴;刘又宁 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军总医院第二附属医院;北京德易生物医学技术有限公司 |
主分类号: | G01N27/64 | 分类号: | G01N27/64 |
代理公司: | 北京北新智诚知识产权代理有限公司 | 代理人: | 耿小强 |
地址: | 100091*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种活动性肺结核病的血清诊断模型的建立方法,其步骤如下:(1)血清来源和制备:包括实验组和对照组;采集受检者静脉血,分离血清后分装,置-80℃冰箱保存,备用;(2)血清的质谱分析,包括:样品处理;蛋白芯片检测;质谱分析;数据采集;(3)统计学分析和差异蛋白的筛选;(4)诊断模型的建立:应用Biomarker Pattern 5.0软件建立诊断活动性肺结核的模型。该模型鉴别活动性肺结核和对照组的灵敏度为96.9%,特异性为97.8%,阳性预测值和阴性预测值分别为97.7%和97.1%,总准确率为97.3%。 | ||
搜索关键词: | 一种 活动性 肺结核病 血清 诊断 模型 建立 方法 | ||
【主权项】:
1、一种活动性肺结核病的血清诊断模型的建立方法,其步骤如下:(1)血清来源和制备:包括实验组和对照组;采集受检者静脉血,分离血清后分装,置-80℃冰箱保存,备用;(2)血清的质谱分析:(a)样品处理取3μl血清与6μl U9缓冲液混匀,冰浴震荡30min;样品变性后,加入360μlCM10结合缓冲液;(b)蛋白芯片检测用200μl CM10结合缓冲液洗涤CM10蛋白芯片后,加入100μl步骤(a)处理后的样品,室温孵育1小时;弃液体,用CM10结合缓冲液洗涤2次;风干后,取出蛋白芯片,每个点加0.5μl饱和的芥子酸溶液;风干后,再重复一次;(c)质谱分析采用质谱仪进行蛋白质谱分析,参数设置如下:激光强度220,最高分子量1000kDa,检测灵敏度9,焦点分子量10kDa;(d)数据采集应用Ciphergen蛋白芯片3.1.1软件采集信噪比为10的血清蛋白峰;(3)统计学分析和差异蛋白的筛选:用Ciphergen ProteinChip BiomarkerWizard软件对步骤(2)之步骤(d)所获得的数据进行统计学分析,设置P<0.01,筛选出50个差异蛋白;(4)诊断模型的建立:应用Biomarker Pattern 5.0软件建立诊断活动性肺结核的模型。
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